[發(fā)明專利]一種核酸提取樣本保存液及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010901050.2
• 申請日: 2020-09-01
• 公開（公告）號: CN111979299A
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發(fā)明（設計）人: 不公告發(fā)明人
• 申請（專利權）人: 簡石生物技術（北京）有限公司
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本申請?zhí)峁┝艘环N核酸提取樣本保存液，其特征在于，所述病毒樣本保存液包括：溶解于DEPC水中的異硫氰酸胍，乙二胺四乙酸，氯化鈉，三(羥甲基)氨基甲烷；以1L計，所述各組份含量為：異硫氰酸胍10g?20g/L，乙二胺四乙酸1g?8g/L，IDHA1?5g/L，氯化鈉8g?15g/L，三(羥甲基)氨基甲烷2g?10g/L和明膠1?5g/L；所述核酸提取樣本保存液可以實現(xiàn)在常溫下保存細胞樣本21日并適應短時間的高溫條件。

技術領域

本發(fā)明涉及醫(yī)學分子檢測技術領域，特別涉及一種核酸提取樣本保存液及其制備方法。

背景技術

樣本保存和核酸提取是現(xiàn)代分子生物學檢測技術的基礎，一般認為提取的血液、細胞等樣本應保存在低溫條件下才能保證其中核酸的穩(wěn)定性。但由于檢測、保存條件的限制，良好的低溫條件在諸如落后偏遠地區(qū)，野外等條件下并不容易實現(xiàn)或者實現(xiàn)程度不高，上述問題經(jīng)常會影響檢測的開展或者檢測結果的準確性。

因此開發(fā)可常溫保存病毒樣本核酸的保存液，不僅可以保證樣品在常溫條件下保存及反復凍融后不降解，增加檢出率；也可以滅活病毒以減少樣本在運輸過程及檢測過程中的傳染風險。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是為了解決病毒樣本(各種拭子、血液的病毒樣本)運輸過程中的核酸降解，影響提取和檢測效果的問題，提供了一種病毒樣本的核酸(RNA、DNA)保存液及其制備方法。保存液可常溫甚至高溫保存病毒樣本，常溫(20～25度)保存21天不降解，高溫(75度)保存24小時內(nèi)不降解。病毒樣本放進保存液即可常溫狀態(tài)下保存21天或高溫下保存24小時，同時使病毒滅活。在保存液內(nèi)的病毒樣本凍存情況下可以反復凍融而不影響病毒核酸的完整性。

一方面，本申請?zhí)峁┝艘环N核酸提取樣本保存液，其特征在于，所述病毒樣本保存液包括：溶解于DEPC水中的異硫氰酸胍，乙二胺四乙酸，氯化鈉，三(羥甲基)氨基甲烷；以1L計，所述各組份含量為：異硫氰酸胍10g-20g/L，乙二胺四乙酸1g-8g/L，IDHA1-5g/L，氯化鈉8g-15g/L，三(羥甲基)氨基甲烷2g-10g/L。

進一步地，其中異硫氰酸胍15g/L，乙二胺四乙酸2g/L，IDHA 2g/L，氯化鈉9g/L，三(羥甲基)氨基甲烷4g/L。

進一步地，其中還包含明膠1-5g/L。

進一步地，其中明膠為3g/L。

另一方面，本申請?zhí)峁┝耸褂蒙鲜龊怂崽崛颖颈４嬉罕４婧怂崽崛∮脴颖镜姆椒ā?/p>

進一步地，所述保存在常溫下進行。

進一步地，所述核酸提取用樣本為血液、體液、拭子、組織、或細胞。

附圖說明

圖1為以人屬細胞(HCT 116)為樣本，25度條件下分別保存0、7、14、21天后進行提取，對提取的RNA進行電泳檢測的結果。

圖2為以人屬細胞(HCT 116)為樣本，75度條件下分別保存0、2、12、24小時后進行提取，對提取的RNA進行電泳檢測的結果。

具體實施方式

保存液配方為異硫氰酸胍15g/L，乙二胺四乙酸2g/L，IDHA 2g/L，氯化鈉9g/L，三(羥甲基)氨基甲烷4g/L，明膠為3g/L。

配制方法為：稱取所需量的各成分于1L的燒杯中，用量筒量取700ml用DEPC水處理過的滅菌水，加入到燒杯中，混勻并溶解各組份試劑，調(diào)PH值至6.5～6.8，定容到1L。采用22μm一次性過濾器進行過濾滅菌，即得保存液。