[發明專利]一種用于克氏原螯蝦親子鑒定的雙重PCR微衛星引物及應用有效

申請號：	202010896704.7	申請日：	2020-08-31
公開（公告）號：	CN111793701B	公開（公告）日：	2023-04-25
發明（設計）人：	沈懷舜;胡亞成;戴天豪;水燕;徐增洪	申請（專利權）人：	中國水產科學研究院淡水漁業研究中心
主分類號：	C12Q1/6888	分類號：	C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
代理公司：	南京經緯專利商標代理有限公司 32200	代理人：	孫昱
地址：	214000 江蘇省無錫***	國省代碼：	江蘇;32
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種用于克氏原螯蝦親子鑒定雙重 pcr 衛星引物應用
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【權利要求書】：

1.一種用于克氏原螯蝦親子鑒定的雙重PCR微衛星引物，其特征在于，包括如下5組引物序列：

2.一種用于克氏原螯蝦親子鑒定的方法，其特征在于，取克氏原螯蝦組織待測樣品；提取克氏原螯蝦樣品DNA；利用權利要求1所述的微衛星引物對克氏原螯蝦樣品DNA進行PCR擴增；把PCR擴增產物在12％的聚丙烯酰胺膠上進行電泳分離；根據分離結果統計每個個體在所有微衛星位點中PCR擴增產物的基因型；根據各個個體的基因分型結果進行個體之間的親子鑒定。

3.根據權利要求2所述的用于克氏原螯蝦親子鑒定的方法，其特征在于，PCR反應體系為：10×PCR?Buffer?2.5ul，2.5mmol/L?dNTP?0.5ul，MgCl₂?1.5ul，每組反應體系兩對引物的上下游引物各1ul，Taq酶0.4ul，DNA模板3ul，超純水13.1ul。

4.根據權利要求2所述的用于克氏原螯蝦親子鑒定的方法，其特征在于，PCR反應程序為：95℃預變性3min；95℃變性30s，退火溫度56℃復性30s，72℃延伸30s，30個循環；72℃延伸10min；4℃保存。

5.根據權利要求2所述的用于克氏原螯蝦親子鑒定的方法，其特征在于，PCR產物用12％的非變性聚丙烯酰胺膠進行電泳。

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