[發(fā)明專利]PDCoV和PEDV共感染仔豬發(fā)病模型及其建立方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010894845.5
• 申請(qǐng)日: 2020-08-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111955419B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張紅壘;魏戰(zhàn)勇;胡慧;鄭蘭蘭;夏璐;韓方方;舒祥力;丁慶文
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01K67/02
• 分類號(hào): A01K67/02
• 代理公司: 鄭州優(yōu)盾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 41125
• 代理人: 冉珊敏

1.PDCoV和PEDV共感染仔豬發(fā)病模型的建立方法，其特征在于，步驟如下：

（1）PDCoV和PEDV毒株的選擇；其中PDCoV毒株為PDCoV-HNZK-02毒株，滴度為1×10⁷TCID₅₀/mL；PEDV毒株為PEDV CV777弱毒株，滴度為2×10⁷ TCID₅₀/mL；

（2）選用5日齡健康仔豬，通過(guò)口服途徑接種PDCoV毒株和PEDV毒株細(xì)胞的混合液；

（3）攻毒后每天測(cè)量體重、觀察臨床癥狀、并通過(guò)熒光定量PCR方法分別檢測(cè)糞便排毒情況和小腸組織中的病毒載量并進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，建立PDCoV和PEDV共感染仔豬發(fā)病模型。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的PDCoV和PEDV共感染仔豬發(fā)病模型的建立方法，其特征在于：所述步驟（2）中混合液中PDCoV毒株和PEDV毒株細(xì)胞的體積均為5mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的PDCoV和PEDV共感染仔豬發(fā)病模型的建立方法，其特征在于：所述步驟（3）中檢測(cè)PEDV毒株的上游引物序列為：5’-CGCAAAGACTGAACCCACTAATTT-3’，下游引物序列為：5’-TTGCCTCTGTTGTTACTTGGAGAT-3’；檢測(cè)PDCoV毒株的上游引物序列為5’-CGTTAACCTCTTCTCACCACTT-3’，下游引物序列為：5’-GCTGAGAGTCTGGTTGGTTATT-3’。

4.利用權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)方法建立的共感染仔豬發(fā)病模型在研究PDCoV和PEDV毒株共感染發(fā)病性狀和致病機(jī)理中的應(yīng)用。