[發(fā)明專利]一種簡易的蔗糖生物傳感器的制備方法

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• 申請日: 2020-08-31
• 公開（公告）號: CN112014447A
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發(fā)明（設計）人: 金萬勤;趙強
• 申請（專利權(quán)）人: 南京工業(yè)大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤

1.一種簡易的蔗糖生物傳感器的制備方法，其具體制備步驟如下：

1)制備鐵氰化錳納米油墨：配制錳鹽和鐵氰根溶液,將錳鹽溶液與鐵氰根溶液按照摩爾比例進行混合，將所得到的混合溶液在離心機中進行離心，清洗，得到鐵氰化錳納米油墨；

2)將合成的鐵氰化錳納米油墨與碳油墨按照一定質(zhì)量配比混合，制備出碳-鐵氰化錳混合油墨；

3)通過絲網(wǎng)印刷技術(shù)在底板材料上印刷出基底電極，其中區(qū)域1工作電極區(qū)域，印刷使用的油墨為步驟2)制備的碳-鐵氰化錳混合油墨；區(qū)域2參比電極區(qū)域，印刷使用的油墨為氯化銀油墨；區(qū)域3對電極區(qū)域，印刷使用的油墨為碳油墨；區(qū)域4為連接觸點，印刷使用的油墨為碳油墨；區(qū)域5為印刷基底材料；

4)配制蔗糖水解酶、葡萄糖變旋酶和葡萄糖氧化酶的混合溶液，向溶液中加入交聯(lián)劑，混合均勻得到酶溶液；取酶溶液滴加到步驟3)中制備的基底電極的工作電極區(qū)域，靜置待酶溶液完全固化，進行冷凍干燥即得到簡易的蔗糖生物傳感器。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟1)中所述的錳鹽溶液為MnSO₄、MnCl₂或Mn(NO₃)₂水溶液，鐵氰根溶液為Na₃Fe(CN)₆或K₃Fe(CN)₆水溶液；錳鹽溶和鐵氰根溶液的濃度范圍均為1-100mM。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟1)中錳鹽溶液與鐵氰根溶液混合的摩爾比例為1:(0.3-2)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟1)中離心機的轉(zhuǎn)速為1000-12000r/min，離心時間為1-30min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟2)中鐵氰化錳納米油墨與碳油墨按照質(zhì)量比為1:(1-99)均勻混合。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟3)中區(qū)域5的印刷基底材料為PVC、PET、陶瓷或金屬。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4)中混合得到的酶溶液中蔗糖水解酶的濃度為0.1-10u/μl，葡萄糖變旋酶的濃度為0.1-10u/μl，葡萄糖氧化酶的濃度為0.1-18u/μl。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4)中酶混合溶液中的交聯(lián)劑含量為0.05-0.4％(v/v)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4)中酶混合溶液中的交聯(lián)劑為戊二醛、丹寧酸、殼聚糖或聚賴氨酸中的一種。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于步驟4)中所取酶溶液的量為10-150μl/cm²,總量根據(jù)工作電極區(qū)域面積來調(diào)節(jié)。