[發(fā)明專利]用于生產(chǎn)芳香醇的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010884719.1
• 申請(qǐng)日: 2014-09-19
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112176000A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-01-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: L·達(dá)維耶;L·羅奇;M·沙爾克
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 弗門尼舍有限公司
• 主分類號(hào): C12P5/00
• 分類號(hào): C12P5/00;C12P7/02;C12N9/02
• 代理公司: 北京三幸商標(biāo)專利事務(wù)所(普通合伙) 11216
• 代理人: 劉卓然

1.一種用于生產(chǎn)倍半萜醇的方法，包括：

i)使式(I)的萜烯與多肽接觸，

其中R是由9個(gè)碳構(gòu)成的飽和的、單不飽和或多不飽和脂肪族基團(tuán)，

該多肽具有p450單加氧酶活性，并且該多肽的氨基酸序列與SEQ ID NO:71或SEQ IDNO:73有至少98％的同一性；以及

ii)任選地分離該醇。

2.權(quán)利要求1的方法，其中，R是支鏈或由一個(gè)或多個(gè)非芳族環(huán)組成。

3.權(quán)利要求1的方法，其中，上述倍半萜醇是α-甜橙醇、β-甜橙醇、α-檀香醇、β-檀香醇、α-反-香檸檬醇、表-β-檀香醇、澳白檀醇和/或它們的混合物。

4.權(quán)利要求3的方法，其中，所生產(chǎn)出的倍半萜醇包含至少36％的順式異構(gòu)體。

5.權(quán)利要求4的方法，其中所生產(chǎn)出的倍半萜醇包含至少46％的順式異構(gòu)體。

6.權(quán)利要求4的方法，其中所生產(chǎn)出的倍半萜醇包含多于50％的順式異構(gòu)體。

7.權(quán)利要求4的方法，其中所生產(chǎn)出的倍半萜醇包含至少72％的順式異構(gòu)體。

8.權(quán)利要求4的方法，其中所生產(chǎn)出的倍半萜醇包含至少96％的順式異構(gòu)體。

9.權(quán)利要求4的方法，其中所生產(chǎn)出的倍半萜醇包含100％的順式異構(gòu)體。

10.權(quán)利要求3的方法，該方法包括：

i)在適合于生產(chǎn)具有p450單加氧酶活性的多肽的條件下培養(yǎng)細(xì)胞，其中，該細(xì)胞：

a)生產(chǎn)丙烯酸焦磷酸酯萜前體；

b)表達(dá)P450還原酶；

c)表達(dá)多肽，該多肽具有α-法呢烯、β-法呢烯、α-檀香萜、β-檀香萜、α-反-香檸檬烯、表-β-檀香萜和/或β-甜沒(méi)藥烯的合酶的活性，并且生產(chǎn)α-法呢烯、β-法呢烯、α-檀香萜、β-檀香萜、α-反-香檸檬烯、表-β-檀香萜和/或β-甜沒(méi)藥烯；并且

d)表達(dá)權(quán)利要求1中所定義的多肽；并且

ii)任選地從該細(xì)胞中分離上述醇。

11.權(quán)利要求10的方法，其中所述丙烯酸焦磷酸酯萜前體從由香葉基焦磷酸(GPP)、法呢基二磷酸(FPP)和香葉基香葉基焦磷酸(GGPP)構(gòu)成的群組中選出。

12.權(quán)利要求11的方法，其中所述丙烯酸焦磷酸酯萜前體是FPP。

13.權(quán)利要求10的方法，其中該細(xì)胞為原核細(xì)胞。

14.權(quán)利要求10的方法，其中該細(xì)胞為細(xì)菌細(xì)胞。

15.權(quán)利要求10的方法，其中該細(xì)胞為真核細(xì)胞。

16.權(quán)利要求15的方法，其中該真核細(xì)胞為酵母細(xì)胞或植物細(xì)胞。

17.權(quán)利要求1的方法，其中該多肽分離自菊苣(Cichorium intybus L.)、巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、檀香樹(shù)(Santalum Album)或黃花蒿(Artemisia annua)。

18.一種分離的多肽，其具有P450單加氧酶活性，并且該多肽的氨基酸序列與SEQ IDNO:71或SEQ ID NO:73有至少98％的同一性。