[發明專利]一種橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法在審
| 申請號： | 202010883618.2 | 申請日： | 2020-08-28 |
| 公開（公告）號： | CN112063671A | 公開（公告）日： | 2020-12-11 |
| 發明（設計）人： | 朱思明;萬文靜 | 申請（專利權）人： | 華南理工大學 |
| 主分類號： | C12P19/60 | 分類號： | C12P19/60;C12N11/14;C12N9/24 |
| 代理公司： | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人： | 蘇運貞 |
| 地址： | 510640 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 橙皮 葡萄 糖苷 高值化酶 法制 方法 | ||
1.一種橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
(1)將磁性碳納米管通過京尼平交聯固定橙皮苷酶或柚皮苷酶，得到固定化酶；
(2)新橙皮苷與金屬離子混合，進行配位反應制備新橙皮苷金屬配合物；
(3)將步驟(1)所得固定化酶加入到步驟(2)所得新橙皮苷金屬配合物的水溶液中，進行酶解反應，得到酶解液；
(4)去除步驟(3)所得酶解液中的金屬離子，得到目的產物。
2.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的京尼平的濃度為0.3wt％～0.5wt％。
3.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的金屬離子為銅離子、鋅離子和亞鐵離子中的至少一種。
4.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的新橙皮苷與金屬離子的配比為摩爾比2:1～4:1。
5.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的配位反應的介質為70％～90％甲醇。
6.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(2)中所述的配位反應的條件為溫度為40～60℃，時間2～3h。
7.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(3)中所述的酶解反應的條件選為：溫度40～60℃，體系pH值5.0～7.0，時間40～80min。
8.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(4)中所述的去除步驟(3)所得酶解液中的金屬離子的具體操作為：在酶解液中加入過量檸檬酸、氨水或EDTA，反應，調節酸堿度至pH6.0～8.0，靜置，即可。
9.根據權利要求1所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
步驟(1)中所述的磁性碳納米管通過如下方法制備得到：在碳納米管的水溶液中加入FeCl3和FeSO4，攪拌，滴加氨水至pH＝9～11，升溫至70～90℃，繼續攪拌30～40min，用永磁鐵收集黑褐色沉淀，并用蒸餾水洗滌，干燥，即得到所述的磁性碳納米管。
10.根據權利要求9所述的橙皮素單葡萄糖苷的高值化酶法制備方法，其特征在于：
所述的碳納米管、FeCl3和FeSO4的配比為質量比10:3～7:2～4。
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