[發明專利]一種用于冷凍電鏡成像用樣品臺

在審

• 申請號: 202010883086.2
• 申請日: 2020-08-28
• 公開（公告）號: CN111999329A
• 公開（公告）日: 2020-11-27
• 發明（設計）人: 孫磊;張建國;張丹陽;季剛;孫飛
• 申請（專利權）人: 中國科學院生物物理研究所
• 主分類號: G01N23/2251
• 分類號: G01N23/2251;G01N23/2204;G01N23/2202
• 代理公司: 北京中強智尚知識產權代理有限公司 11448
• 代理人: 黃耀威

本發明公開了一種用于冷凍電鏡成像用樣品臺，包括底座和可拆卸的填充部件，所述底座為圓盤狀結構，所述底座上設有凸沿，所述凸沿與底座圍成用于容置樣品的空腔，所述填充部件能夠在高壓冷凍時對所述凸沿的外側壁與底座形成的階梯結構進行填充，并在預減薄過程中取下。本發明可以容納加載高端冷凍透射電鏡上樣環，并可穩定地被固定在上樣環和上樣底座之間，并可以被電鏡Autoloader中的機械手抓取，并放入鏡筒中進行成像。因此，本發明提供的樣品臺可應用于Autoloader的冷凍電鏡上。

技術領域

本發明涉及生物樣品檢測領域，特別涉及一種用于冷凍電鏡成像用樣品臺。

背景技術

近年來，得益于冷凍電子斷層成像技術(cryo-electron tomography，cryo-ET)的發展，原位結構生物學研究發展迅速，其研究對象的狀態更接近生理條件，解析結構的分辨率也在不斷提高。其最終目的是原位解析生物大分子及分子機器的結構，從而在分子、細胞器、細胞等不同層次上闡述生命活動的本質。

冷凍電子斷層成像技術一般要求樣品厚度在500nm以下，否則成像時會產生過多的非彈性散射電子使得照片信噪比嚴重下降，后續圖像處理難以進行。由于絕大部分細胞和組織樣品的厚度遠超500nm，因此這類樣品采取的技術路線是冷凍固定——冷凍聚焦離子束(Cryo-FIB)減薄——冷凍電子斷層成像。通常，一些小細胞通過快速冷凍的方式，冷凍固定于電鏡專用的載網之上，然后通過冷凍聚焦離子束減薄后進行冷凍電鏡成像。但是快速冷凍的冷凍深度最多在十幾個微米，對厚度動輒在幾十到幾百微米的組織和一些大尺度細胞而言，單純的快速冷凍無法使樣品結構得到良好的固定，因此必須通過高壓冷凍的技術。高壓冷凍后產生的樣品塊經過冷凍切片機的修塊，再通過冷凍聚焦離子束減薄到幾百納米，最終送入冷凍電鏡進行成像。

為了提高成像分辨率，人們使用帶有Autoloader的冷凍電鏡，如FEI Titan Kros進行成像，這類電鏡分辨率高，可以得到更加真實清晰的原位結構。然而，電鏡所用的樣品承載工具是載網，高壓冷凍所用的樣品承載工具是樣品臺，Autoloader無法裝載樣品臺，因此，現有的樣品臺無法應用到Autoloader的冷凍電鏡上。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于冷凍電鏡成像用樣品臺，以解決現有的樣品臺無法應用到Autoloader的冷凍電鏡上的問題。

根據本發明的實施例，提供了一種用于冷凍電鏡成像用樣品臺，包括底座和可拆卸的填充部件，所述底座為圓盤狀結構，所述底座上設有凸沿，所述凸沿與底座圍成用于容置樣品的空腔，所述填充部件能夠在高壓冷凍時對所述凸沿的外側壁與底座形成的階梯結構進行填充，并在預減薄過程中取下。

具體地，所述凸沿和填充部件均為環狀結構，所述填充部件能夠套設在所述凸沿的外側壁上。

具體地，所述凸沿的中心與所述底座的中心相重合。

具體地，所述填充部件的高度與所述凸沿外側壁的高度相同。

具體地，所述底座和填充部件采用導熱的金屬材料制成。

本發明實施例提供了一種用于冷凍電鏡成像用樣品臺，可以容納加載高端冷凍透射電鏡上樣環，并可穩定地被固定在上樣環和上樣底座之間，并可以被電鏡Autoloader中的機械手抓取，并放入鏡筒中進行成像。因此，本發明提供的樣品臺可應用于Autoloader的冷凍電鏡上。

附圖說明

為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案，下面將對實施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創造性勞動的前提下，還可以根據這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發明實施例提供的一種冷凍電鏡成像用樣品臺的結構圖；

圖2為底座的結構圖；