[發(fā)明專利]雜交瘤細(xì)胞株及其制備方法和應(yīng)用、單克隆抗體及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010880376.1
• 申請日: 2020-08-27
• 公開（公告）號: CN111996173B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉先成;于蕾;曾映;胡明龍;楊寧
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳普門科技股份有限公司
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/26;G01N33/577;G01N33/74
• 代理公司: 廣東恩典律師事務(wù)所 44549
• 代理人: 張紹波;李健

1.一種雜交瘤細(xì)胞株，其特征在于，所述雜交瘤細(xì)胞株的保藏號為GDMCC No：61044或者所述雜交瘤細(xì)胞株的保藏號為GDMCC No：61043。

2.一種單克隆抗體，其特征在于，由權(quán)利要求1所述的雜交瘤細(xì)胞株分泌。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體由保藏號為GDMCCNo：61044的所述雜交瘤細(xì)胞株分泌，所述單克隆抗體能夠識別氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的多肽片段。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的單克隆抗體，其特征在于，所述單克隆抗體由保藏號為GDMCCNo：61043的所述雜交瘤細(xì)胞株分泌，所述單克隆抗體能夠識別氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示的多肽片段。

5.一種雜交瘤細(xì)胞株的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

采用胰島素原免疫小鼠，獲得免疫后的小鼠；及

提取所述免疫后的小鼠的脾細(xì)胞，并與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選，得到雜交瘤細(xì)胞株；

所述篩選的步驟包括：采用多肽并按照ELISA方法對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，得到所述雜交瘤細(xì)胞株，其中，所述多肽包括第一片段及第二片段中的至少一個，所述第一片段如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列，所述第二片段如SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的雜交瘤細(xì)胞株的制備方法，其特征在于，所述采用多肽并按照ELISA方法對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選的步驟包括：

采用胰島素并按照ELISA方法對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，得到陽性細(xì)胞；及

采用所述第一片段及所述第二片段中的一個并按照ELISA方法對所述陽性細(xì)胞進(jìn)行篩選，得到所述雜交瘤細(xì)胞株。

7.權(quán)利要求1所述的雜交瘤細(xì)胞株、或者權(quán)利要求2～4任一項所述的單克隆抗體、或者權(quán)利要求5～6任一項所述的雜交瘤細(xì)胞株的制備方法制備得到的雜交瘤細(xì)胞株在制備胰島素檢測試劑、胰島素檢測試劑盒或者胰島素檢測裝置中的應(yīng)用。

8.一種胰島素檢測試劑盒，其特征在于，包括：第一抗體和第二抗體，所述第一抗體含有由保藏號為GDMCC No：61044的雜交瘤細(xì)胞株及保藏號為GDMCC No：61043的雜交瘤細(xì)胞株中的一個分泌的單克隆抗體，所述第二抗體含有由保藏號為GDMCC No：61044的雜交瘤細(xì)胞株及保藏號為GDMCC No：61043的雜交瘤細(xì)胞株中的另一個分泌的單克隆抗體。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的胰島素檢測試劑盒，其特征在于，所述第一抗體及所述第二抗體中的一個為標(biāo)記物標(biāo)記的抗體，所述標(biāo)記物包括發(fā)光標(biāo)記物。

10.一種胰島素檢測裝置，其特征在于，包括權(quán)利要求2～4任一項所述的單克隆抗體或者權(quán)利要求8～9任一項所述的胰島素檢測試劑盒。