[發明專利]一株綠針假單孢菌及其應用

有效

• 申請號: 202010868222.0
• 申請日: 2020-08-26
• 公開（公告）號: CN111944728B
• 公開（公告）日: 2022-02-22
• 發明（設計）人: 王剛;王淼;王俊芳;劉鳳英;張震
• 申請（專利權）人: 河南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/27;A01P3/00;A01G7/06;A01G13/00;C12R1/38
• 代理公司: 無錫蘇元專利代理事務所(普通合伙) 32471
• 代理人: 王清偉

本發明公開了一株綠針假單孢菌，分類命名為Pseudomonas cholroraphis subsp.aurantiaca Zm?1，已于2019年12月25日保藏于中國武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M 20191103。本發明的綠針假單胞菌Zm?1對花生白絹病病原菌具有拮抗作用，在大田環境下噴灑處理花生可以大大降低花生白絹病的發病比率，起到較好的生防效果，并且綠針假單胞菌Zm?1可以在花生根際良好的定殖，使得花生可持續性的對抗花生白絹病病原菌，延長其生防效果，從而有效的提高產量。

技術領域

本發明涉及一種綠針假單孢菌及其在生物防止中的應用。

背景技術

花生白絹病是由花生白絹病致病菌—齊整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc.)侵染花生莖基部、果柄、果莢及根引起的是一種真菌性土傳病害?；ㄉ静『?染病部位呈褐色軟腐狀，表面長出白色絹絲狀菌絲體?；ㄉ酌缙谌静斐捎酌缜o葉枯黃、枯死，成株期造成葉片黃化凋萎、植株死亡。近年來，花生白絹病的發生頻率不斷增強，嚴重地塊病株率達到60％以上,直接影響花生的產量與品質，甚至會造成絕收?；ㄉ筇锶静?擴散蔓延較快,而且一旦入侵，連年積累，很難防治和根除。

目前，對于花生白絹病病害尚缺乏有效抗病品種，病害的防治主要通過化學防治的方法，由于農藥的大量使用，不僅導致花生種植成本的提高，還存在農藥殘留、環境污染等問題。生物防治作為一種有廣泛前途的植物病害的防治方法，目前已經成為國內外研究和應用的熱點。

發明公開號CN108893418A的發明專利“一種沼澤紅假單胞菌LY-6菌劑及制備及其對番茄白絹病防治的應用”公開了一株可以用于生物防止的沼澤紅假單胞菌LY-6菌劑，其液態發酵液可環境友好的在一定程度上抑制白絹病的生長，但其抑菌率僅為76.7％,需要進一步提高，另外其采用發酵液離心后得到的上清液施入作物，其沼澤紅假單胞菌菌株不能在花生的根基持續性存在，抑制白絹病的持續性和穩定性就收到了限制。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有技術中生物防治花生白絹病的菌株抑菌效果有待進一步提高的缺陷，提供一株綠針假單孢菌及其應用。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

一株綠針假單孢菌，分類命名為Pseudomonas cholroraphis subsp.aurantiacaZm-1，已于2019年12月25日保藏于中國武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:M 20191103。

本發明的綠針假單胞菌Zm-1是從開封田間，知母草植株中分離得到的，短桿狀，個體較小，兩端鈍圓，革蘭氏陰性，接觸酶實驗陰性，不產生芽孢，在LB平板上菌落不透明、光滑、濕潤、橙色、單極生鞭毛，該菌具有運動性，產生過氧化氫酶、吩嗪及其衍生物等可能的生防相關因子。該綠針假單孢菌及其突變體、代謝產物可以按照常規方法用于對花生白絹病的生物防治。

在盆栽實驗中，將綠針假單胞菌Zm-1菌株在LB培養基中擴大培養后，制備成一定濃度的菌懸液。花生花期接種白絹病菌，每株莖基部周圍放置2g麥粒沙白絹病菌培養物，并無菌保濕60h。3d后用噴壺均勻噴灑綠針假單胞菌Zm-1菌懸液。接種白絹病菌后第7d開始調查植株的發病株數及發病程度,每隔7d調查一次。在大田實驗中接入白絹病菌7d后，用噴霧器噴灑方式將菌液(菌懸液濃度6×10⁸cell.mL^-1)遍淋花生莖基部。8d后進行第二次噴灑，對照噴灑等量清水。噴灑生防菌液前，第一次噴灑生防菌液20d后和收獲2d前分別調查發病株數。