[發明專利]鉤藤發根的高效誘導和培養方法有效
| 申請號： | 202010863261.1 | 申請日： | 2020-08-25 |
| 公開（公告）號： | CN111937749B | 公開（公告）日： | 2021-11-19 |
| 發明（設計）人： | 強瑋;張明生;譚艾娟;路星星;付維 | 申請（專利權）人： | 貴州大學 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 重慶航圖知識產權代理事務所(普通合伙) 50247 | 代理人： | 王貴君 |
| 地址： | 550025 貴州省*** | 國省代碼： | 貴州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鉤藤 發根 高效 誘導 培養 方法 | ||
【權利要求書】：
1.鉤藤發根的高效誘導和培養方法，其特征在于，包括如下步驟：將活化的發根農桿菌C58C1用于浸染經預培養的鉤藤外植體，然后接種于共培養的培養基上暗培養3d，然后轉移至發根誘導培養基上誘導培養；
所述預培養為將鉤藤的葉或莖剪出傷口接種于預培培養基上暗培養5天，所述預培培養基為WPM+2 mg·L-12,4-D+0.5 mg·L-1 6-BA+ 3 g·L-1蔗糖+7.2‰瓊脂，pH為5.8-6.0；
所述共培養的培養基為WPM+100 μmol·L-1乙酰丁香酮+30 g·L-1蔗糖+7.2‰瓊脂；
所述浸染為將活化的C58C1加入含有濃度為100 μmol·L-1乙酰丁香酮的WPM液體培養基使其懸浮，28℃、200 r/min搖床中活化培養30 min，使發根農桿菌適應WPM培養基；調整菌液OD600=0.6，然后將預培養的外植體置于活化的菌液中，使發根農桿菌浸染外植體7-8min，倒去菌液，將外植體置于濾紙上，將外植體表面的水分吸干；
所述誘導培養為25 ℃培養20 d，每5 d 更換一次WPM固體培養基；
所述誘導培養基為WPM+400 mg·L-1頭孢克肟+30 g·L-1蔗糖+7.2 ‰瓊脂。
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