[發明專利]一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法

在審

• 申請號: 202010857742.1
• 申請日: 2020-08-24
• 公開（公告）號: CN112014512A
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 曹君;甄曉婷;陳嫣;董新;楊娟
• 申請（專利權）人: 杭州師范大學
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;G01N30/88
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

1.一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）制備石斛樣品溶液：對鐵皮石斛進行粗提后，獲得石斛樣品溶液；

（2）制備背景緩沖液：所述背景緩沖液為含有十二烷基硫酸鈉、甲醇、正丁醇、乙酸乙酯的磷酸溶液；

（3）制備環糊精溶液：所述環糊精溶液為含有環糊精的磷酸溶液；

（4）活化毛細管柱；

（5）進樣：將環糊精溶液通過壓力進樣注入毛細管柱中，再將石斛樣品溶液通過電動進樣注入毛細管柱中；

（6）毛細管電泳：將毛細管柱的兩端插入背景緩沖液中，施加反向電壓，進行毛細管電泳，獲得電泳色譜圖；

（7）數據分析：測量電泳色譜圖中各類三嗪類除草劑的峰面積，根據各類三嗪類除草劑的濃度-峰面積標準曲線，獲得石斛樣品溶液中各類三嗪類除草劑的濃度，從而獲得鐵皮石斛中各類三嗪類除草劑的含量。

2.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（3）中，所述環糊精為α-環糊精。

3.如權利要求2所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（3）中，所述環糊精溶液中，α-環糊精的濃度為50~70mM。

4.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（2）中，所述背景緩沖液中的甲醇體積分數為15%~25%。

5.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（2）中，所述背景緩沖液中的磷酸濃度為80~90mM。

6.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（5）中，在將石斛樣品溶液通過電動進樣注入毛細管柱中之前，先向石斛樣品溶液中加入十二烷基硫酸鈉和磷酸。

7.如權利要求5所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，加入十二烷基硫酸鈉后，石斛樣品溶液中的十二烷基硫酸鈉濃度為20~40mM。

8.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于：

步驟（5）中，所述電動進樣的電壓為-8~-12kV；和/或

步驟（5）中，所述電動進樣的進樣時間為60~80s；和/或

步驟（5）中，所述壓力進樣的壓力為0.4~0.6psi；和/或

步驟（5）中，所述壓力進樣的進樣時間為50~60s。

9.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（1）的具體過程如下：將鐵皮石斛與乙腈按1g:40~50mL的質量體積比混合，靜置2~3min；加入無水硫酸鎂和氯化鈉，所述鐵皮石斛、無水硫酸鈉、氯化鈉的質量比為1:0.8~1.2:2~2.5，充分混合后，離心，取上清液；加入N-丙基乙二胺，充分混合后，離心，取上清液；加水，所述鐵皮石斛與水的質量體積比為1g:0.1~0.13mL，渦旋后，經過濾器過濾，獲得石斛樣品溶液。

10.如權利要求1所述的一種鐵皮石斛中三嗪類除草劑的檢測方法，其特征在于，步驟（7）中，所述各類三嗪類除草劑的濃度-峰面積標準曲線通過以下方法獲得：

（a）制備標準溶液：將各類三嗪類除草劑和水配制成標準溶液；所述標準溶液中，各類三嗪類除草劑的濃度相同；

（b）獲得電泳色譜圖：將步驟（2）~（6）中的石斛樣品溶液換成標準溶液，按照步驟（2）~（6）獲得標準溶液的電泳色譜圖，測量各類三嗪類除草劑的峰面積；

（c）獲得標準曲線：將標準溶液設置成不同濃度梯度，重復步驟（b），獲得不同濃度標準溶液的電泳色譜圖；以濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，分別繪制各類三嗪類除草劑的濃度-峰面積標準曲線。