[發明專利]一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法

在審

• 申請號: 202010857218.4
• 申請日: 2020-08-24
• 公開（公告）號: CN111944703A
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 許天委;王偉;丁兆建;郝慧華
• 申請（專利權）人: 瓊臺師范學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N3/00;C12R1/645
• 代理公司: 成都瑞創華盛知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 51270
• 代理人: 鄧瑞;辜強

1.一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1、消毒，首先對培養容器進行消毒，噴灑消毒水、放置于高溫箱內進行高溫消毒、使用超聲清洗箱進行清洗，清洗消毒后對容器進行干燥，備用；

S2、初步培養，將消毒后的容器按照容量進行挑選，選定容量后將綠僵菌放置進入容器，在容器中添加菌絲隔膜間裂殖使得容器內產生芽生孢子，培養時間為20h；

S3、中步培養，綠僵菌分生孢子開始萌發，原生質轉移至芽管生長點，芽管自孢子一端或兩端伸出，30-33h菌體呈網狀，40-42h菌體呈團狀，55-58h菌體出現產孢結構，開始形成液生芽孢子，液生芽孢子，呈長卵形，68h液生芽孢子開始大量形成；

S4、進階培養，將容器放置在溫度環境潮濕的環境內，濕度環境控制在空氣濕度大于65％，培養至菌絲體滿布容器；

S5、完成后在容器內添加吐溫溶液稀釋配制球孢綠僵菌分生孢子，1h之后得到容器內部的綠僵菌分生孢子懸液；

S6、將膠囊制備設備進行消毒并等待干燥后進行微膠囊生產，將S5中的到綠僵菌分生孢子乳液進行加工成囊后的到綠僵菌分生孢子微膠囊；

S7、將生產好的綠僵菌分生孢子微膠囊進行包裝按照所需質量添加至不同的包裝器皿中，并在室內溫度適宜的條件下進行儲存。

2.根據權利要求1所述的一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：S1中，對培養器皿消毒后繼續對培養室進行消毒，采用噴灑式消毒，對培養室以及進入室內的人員進行全方面消毒。

3.根據權利要求1所述的一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：S4中，得出培養后的僵菌分生孢子在進行下一工序時提前進行干燥出來，干燥環境為熱蒸干燥或是電加熱干燥。

4.根據權利要求1所述的一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：S5中，孢懸液接種液按10％接種量接種至固體發酵培養基中，在22攝氏度條件下培養10天后，得到綠僵菌孢子。

5.根據權利要求1所述的一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：S2中，可進行振蕩培養。

6.根據權利要求5所述的一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：振蕩培養，擺動搖晃器皿進行振蕩，振蕩時間為一次2分鐘，每次間隔1-1.5小時。

7.根據權利要求1所述的一種綠僵菌分生孢子微膠囊乳液制備的方法，其特征在于：S7中，對于儲存的瓶子進行標記，并對不同容量、不同質量的容器進行區分。