[發明專利]一種利用白酒糟生產黑曲霉的技術方法

在審

• 申請號: 202010848279.4
• 申請日: 2020-08-21
• 公開（公告）號: CN111778166A
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 彭楠;常章兵;田建平;梁運祥
• 申請（專利權）人: 四川潤格生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/685
• 代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901
• 代理人: 陳巍

本發明公開了一種利用白酒糟生產黑曲霉的技術方法，屬于發酵工程技術領域，通過將白酒發酵后剩余的白酒糟制備成培養基，將黑曲霉菌種活化后接種到該白酒糟培養基中誘導產孢，然后經硫酸銨分級沉淀得到黑曲霉。本發明利用白酒糟生產黑曲霉的技術方法，能夠解決現有技術中利用白酒糟生產黑曲霉存在的菌種難以分離、活菌數量低的技術問題，顯著提高了黑曲霉的產量并解決了白酒糟中營養物質無法得到充分利用的問題。

技術領域

本發明涉及發酵工程技術領域，特別是涉及一種利用白酒糟生產黑曲霉的技術方法。

背景技術

黑曲霉是曲霉屬真菌中的一個常見種，廣泛分布于糧食、植物性產品和土壤中。黑曲霉在食品工業上可用作發酵菌種，如用于食醋生產制曲、麩曲法白酒生產制曲、檸檬酸發酵等，主要是利用黑曲霉分泌產生淀粉酶、糖化酶、檸檬酸、葡萄糖酸、五倍子酸等的功能；在生物肥料工業上，黑曲霉具有裂解大分子有機物和難溶無機物，便于作物吸收利用，改善土壤結構，增強土壤肥力，提高作物產量的效果；還可用來測定錳、銅、鉬、鋅等微量元素和作為霉腐試驗菌等。

在白酒釀造生產過程中會產生大量的酒糟，據統計，每生產一噸白酒約產生三噸至五噸酒糟，該酒糟具有量大集中，容易腐敗變質，不易儲存，極易污染環境的特點，嚴重制約了酒糟中高價值物質的提取、利用和應用研究。

白酒酒糟中除含大量的水分外，還含有豐富的纖維素和半纖維素、大量的氨基酸、酸、酯、醇、羰基化合物等有機物質和其它無機物質，是一種非常好的可再生原料，可廣泛應用于食品、化工、紡織、印刷、醫藥衛生等行業，具有非常高的實用價值和研究價值，而結構分析結果進一步表明，酒糟中含有約10-12％的多縮戊糖類物質，如不加以利用，會導致原料的浪費。因此，如何對酒糟進行高效提取利用，使其變廢為寶，越來越受到成廣大研究者的關注。

現有技術中已經有研究利用白酒糟生產菌體，但其不可避免的存在菌種難以分離、活菌數量低的問題。因此，提供一種菌種易于分離且活菌數量高的利用白酒糟生產黑曲霉的方法，具有重要的實際意義。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用白酒糟生產黑曲霉的技術方法，以解決上述現有技術存在的問題，使得利用白酒糟生產黑曲霉時菌種易于分離且活菌數量高。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種利用白酒糟生產黑曲霉的技術方法，包括以下步驟：

a.將黑曲霉菌株接種到固體PDA培養基平板上，37℃活化培養至黑曲霉孢子長滿培養基平板的三分之二；

b.將長在PDA培養基平板上的黑曲霉孢子刮下，加入無菌水制備成黑曲霉孢子懸液；

c.將黑曲霉孢子懸液接種到白酒糟培養基中，25-40℃恒溫培養誘導產孢7-12d；

d.向含有黑曲霉孢子的白酒糟培養基中加入10倍體積的蒸餾水，在25℃下震蕩2h，抽濾，將濾液離心,收集上清液。

e.將上清液經硫酸銨分級沉淀得到黑曲霉。

進一步地，所述黑曲霉孢子懸液的孢子濃度為1.5×10³-2.5×10³cfu/ml。

進一步地，步驟d中離心力為12000×g，離心時溫度為4℃，時間為15min。

進一步地，步驟c中黑曲霉孢子懸液與白酒糟培養基的體積質量比(4-5):1000。

進一步地，步驟e硫酸銨分級沉淀的方法為：向上清液中加入硫酸銨至硫酸銨的質量體積濃度為45％，過濾除去產生的沉淀；然后繼續加入硫酸銨至硫酸銨的質量體積濃度為80％，過濾得到黑曲霉。

進一步地，所述白酒糟培養基的制備方法包括以下步驟：