[發明專利]一種利用白酒糟生產屎腸球菌的技術方法

有效

• 申請號: 202010847873.1
• 申請日: 2020-08-21
• 公開（公告）號: CN111748504B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 彭楠;常章兵;田建平;梁運祥
• 申請（專利權）人: 四川潤格生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/38;A23K10/18;A23K10/12;A23K10/30;C12R1/01
• 代理公司: 北京盛詢知識產權代理有限公司 11901
• 代理人: 陳巍

1.一種利用白酒糟生產屎腸球菌的技術方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取屎腸球菌凍干菌粉置于改良MRS培養基中，劃線培養，挑取3-5個典型屎腸球菌單菌落連續純化傳代復壯3次，選取最優屎腸球菌單菌落，作為一級種子液菌種；

(2)無菌操作挑取篩選的屎腸球菌單菌落接種于一級種子培養液中，搖床培養得一級種子液；然后進一步接種到二級種子培養液中培養獲得二級種子液；

(3)將制備好的二級種子液接種到含有經預處理的白酒糟的固態發酵培養基中，發酵培養；

(4)發酵結束后，將發酵產物烘干粉碎得屎腸球菌固態發酵產品；

以質量份數計，步驟(3)中含有經預處理的白酒糟的固態發酵培養基中含有以下成分：經過預處理的白酒糟30-60份，酵母浸粉0.1-2份，硫酸鎂0-1份，硫酸錳0-1份，水30-40份，pH值6-7.5，高溫滅菌；接種量5-10％；

所述預處理的白酒糟的制備方法包括以下步驟：

①將鮮白酒糟分篩出稻殼后置于水中，調節pH值為6-8，浸泡處理后干燥、粉碎過篩得白酒糟粉；

②所得白酒糟粉和玉米淀粉加水調和均勻后進行膨化處理，粉碎過篩得膨化白酒糟/玉米淀粉混合物；

步驟①中，浸泡時間12-48h，浸泡溫度為60-80℃，粉碎過40目篩。

2.根據權利要求1所述的白酒糟生產屎腸球菌的技術方法，其特征在于，以質量份數計，步驟(1)中，MRS培養基包含以下成分：葡萄糖1-2份，蛋白胨0.5-1.5份，牛肉膏0.5-1.5份，酵母浸粉0.2-1份，氯化鈉0.2-0.8份，瓊脂粉1-3份，碳酸鈣0.1-3份，檸檬酸二銨0.1-1份，吐溫0.08-0.1份，硫酸鎂0.02-0.1份，硫酸錳0.01-0.05份，純化水85-96份；培養條件為35-37℃。

3.根據權利要求1所述的白酒糟生產屎腸球菌的技術方法，其特征在于，以質量份數計，步驟(2)中的一級培養基包含以下組分：蔗糖1-2份，葡萄糖1-2份，蛋白胨0.5-1.5份，碳酸鈣1-5份，酵母浸粉0.2-1份，氯化鈉0.2-0.8份，牛肉膏0.5-1.5份，硫酸鎂0-0.8份，硫酸錳0.1-0.8份，磷酸氫二鉀0.8-3.5份，純化水86-95份；

二級培養基包含以下組分：蔗糖2-3份，葡萄糖0-1.5份，蛋白胨0.5-1.5份，碳酸鈣1-5份，酵母浸粉0.2-1份，氯化鈉0.2-0.8份，牛肉膏0.5-1.5份，硫酸鎂0-0.8份，硫酸錳0.1-0.8份，磷酸氫二鉀0.8-3.5份，純化水86-95份；

一級種子液接種至二級培養基的接種量為5-10％；

培養條件為30-40℃，制備一級種子液的培養時間為8-12h，制備二級種子液的培養時間為12-24h。

4.根據權利要求1所述的白酒糟生產屎腸球菌的技術方法，其特征在于，步驟②中，白酒糟和玉米粉的混合比例為(6-8)∶2，加水量為白酒糟粉和玉米淀粉混合物總量的30-50％。

5.根據權利要求1所述的白酒糟生產屎腸球菌的技術方法，其特征在于，步驟②中，膨化溫度為100-150℃，膨化處理后粉碎過60目篩。