[發明專利]一種山黧豆生物組分的多級分離方法

有效

• 申請號: 202010839805.0
• 申請日: 2020-08-19
• 公開（公告）號: CN111944011B
• 公開（公告）日: 2023-03-07
• 發明（設計）人: 車團結;李春;李琳;魏所成;徐全樂;沈頌東;張瑩;李瀟玲;鄭曉玲
• 申請（專利權）人: 蘭州百源基因技術有限公司
• 主分類號: C07K1/36
• 分類號: C07K1/36;C07K1/16;C07K1/30;C08B30/04
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 成珊

本發明涉及豆科植物加工利用技術領域，具體涉及一種山黧豆生物組分的多級分離方法。本發明提供的山黧豆生物組分的多級分離方法，包括如下步驟：將山黧豆粉碎，加水浸提，得到浸提液；將浸提液過濾，得到纖維素和濾液；將濾液進行凝膠層析，得到第一洗脫液；將第一洗脫液濃縮后再進行凝膠層析，得到第二洗脫液；將第二洗脫液濃縮，濃縮后加水，攪拌，離心分離，得到蛋白質溶液和淀粉沉淀；向所述蛋白質溶液中加入硫酸銨水溶液，過濾，得濾渣，濾渣干燥，得到蛋白質。本發明提供的山黧豆生物組分的多級分離方法可實現山黧豆中纖維素、蛋白質和淀粉成分的高效分離，實現了山黧豆的分類利用。

技術領域

本發明涉及豆科植物加工利用技術領域，具體涉及一種山黧豆生物組分的多級分離方法。

背景技術

山黧豆為豆科山黧豆屬植物，分布于朝鮮、日本和俄羅斯遠東地區，在中國普遍分布于東北、華北、陜西、甘肅南部、青海東部。山黧豆多生于山坡、林緣、路旁、草甸等處，最高可到海拔2500米的地方生存，粗生，喜溫暖濕潤環境。山黧豆種子中蛋白質含量約為25％～28％，淀粉含量約為55％～61％，是比較理想的高蛋白豆科飼料作物，也是良好的植物淀粉資源。但由于山黧豆中含有山黧豆毒素(ODAP)，其神經毒素含量未達到安全食用水平，這使得山黧豆未得到廣泛應用，然而這無疑會造成山黧豆資源的巨大浪費，因此，如何將山黧豆中的生物組分進行有效分離成為一大研究熱點。

現有山黧豆中生物組分(如淀粉、蛋白質等)的分離多采用水提法進行，然后根據生物組分在水中的比重不同，進而通過離心、過濾等手段實現山黧豆中生物組分的分離，然而現有分離方法分離效率較低，淀粉、蛋白質等組分的提取率不高，造成部分山黧豆資源的浪費。

發明內容

本發明的目的在于克服現有山黧豆的分離方法淀粉、蛋白質等組分的提取率不高，無法高效分離山黧豆中生物組分的缺陷，進而提供一種山黧豆生物組分的多級分離方法。

為達到上述目的，本發明采用如下技術方案：

一種山黧豆生物組分的多級分離方法，包括如下步驟：

1)將山黧豆粉碎，加水浸提，得到浸提液；

2)將浸提液過濾，得到纖維素和濾液；

3)將濾液進行凝膠層析，得到第一洗脫液；

4)將第一洗脫液濃縮后再進行凝膠層析，得到第二洗脫液；

5)將第二洗脫液濃縮，濃縮后加水，攪拌，離心分離，得到蛋白質溶液和淀粉沉淀；

6)向所述蛋白質溶液中加入硫酸銨水溶液，過濾，得濾渣，濾渣干燥，得到蛋白質。

優選的，步驟3)中所述凝膠層析處理步驟中所用洗脫液為正丁醇和醋酸水溶液的混合液；

步驟4)中所述凝膠層析處理中所用洗脫液為正丁醇和醋酸水溶液的混合液。

優選的，所述正丁醇和醋酸水溶液的質量比為(1.5-3):1；

所述醋酸水溶液的濃度為30-40wt％。

優選的，所述洗脫液為正丁醇、醋酸水溶液和2-乙氧基丁烷的混合液。

優選的，所述正丁醇、醋酸水溶液和2-乙氧基丁烷的質量比為(0.8-0.9):1:(0.2-0.3)。

優選的，所述正丁醇、醋酸水溶液和2-乙氧基丁烷的質量比為0.9:1:0.2；

所述醋酸水溶液的濃度為35wt％。

優選的，步驟3)中利用葡聚糖凝膠柱G-10對濾液進行凝膠層析；

步驟4)中利用葡聚糖凝膠柱G-25對濃縮后的第一洗脫液進行凝膠層析。