[發(fā)明專利]可用于防治根結線蟲的淡紫紫孢菌及其用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010839516.0
• 申請日: 2020-08-19
• 公開（公告）號: CN111996126B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發(fā)明（設計）人: 王科晶;余昕彤;曹鴻一;王琳
• 申請（專利權）人: 慕恩（廣州）生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A01N63/30;A01P5/00;C12R1/645
• 代理公司: 北京律智知識產權代理有限公司 11438
• 代理人: 于寶慶;李華

本申請?zhí)峁┝艘环N分離的淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)菌株，包含其的組合物以及其用于防治根結線蟲(Meloidogyne)的用途。所述菌株產孢能力強、活菌數(shù)高、防治效果好、能夠用于各種植物的防治。

技術領域

本申請涉及微生物防治領域，更具體涉及淡紫紫孢菌及其在農業(yè)生產中的應用。

背景技術

根結線蟲(Root-Knot Nematodes(RKN)，拉丁名Meloidogyne)的寄主范圍廣泛，能夠侵染114個科的超過3000種植物，包括單子葉、雙子葉及草本植物，是全世界農業(yè)中的主要害蟲，可造成作物減產10％～20％，嚴重時可達75％以上，每年造成的經濟損失估計約為1180億美元。RKN會在植物的根部形成根結，阻止水分和養(yǎng)分的吸收并且侵染的傷口會促進病原微生物的感染。南方根結線蟲(Meloidogyne incognita)感染幾乎所有栽培植物的根，是最重要的RKN菌種之一。

目前防治RKN主要采用化學防治、輪作以及抗性育種。然而，化學防治面臨污染、耐藥性等問題，而農業(yè)生產中有效的抗性品種資源有限。相比之下，生物農藥以其高效、低毒、低殘留、無污染、不易產生抗藥性和原料易得等特性被人們認為是未來化學農藥的理想替代藥劑。

淡紫紫孢菌在線蟲防治領域的研究已有數(shù)年，其能寄生根結線蟲的卵和卵囊，也能寄生雌蟲和幼蟲。卵在胚胎發(fā)育早期最易受感染，菌絲或分生孢子可直接穿刺進入。菌絲能順利地在根結線蟲卵囊內生長，包圍卵粒進而侵染卵，菌絲與卵接觸后在線蟲表面產生特殊的結構一附著胞，利用機械壓力和真菌胞外分泌幾丁質酶和蛋白酶將卵殼消解，進而進行侵染直到胚胎完全被菌絲取代。

然而，不同來源的淡紫紫孢菌菌株的生理特性、功能特性等都存在極大差異，缺乏真正可高效、廣泛施用、且適于工業(yè)化生產的高效菌株。如專利CN102851219A中公開了從線蟲病重發(fā)的香蕉植株中分離得到的一株野生型淡紫擬青霉E16菌株，該菌株僅對香蕉根結線蟲具有高致病性，作用對象單一。又如專利CN107058120A中公開了一株經紫外誘變的淡紫紫孢菌P136-1-1菌株，該菌株能高效殺死黃瓜根結線蟲，但該菌株的產孢能力不高(5.9高10⁸孢子/皿，20mL/皿)，且經過紫外誘變處理后具有不定向性，難以滿足工業(yè)化生產的需求。

基于此，本發(fā)明旨在篩選出一株產孢能力強、作用對象廣、對根結線蟲致病性高的、適于工業(yè)化生產的野生型菌株。

發(fā)明概述

第一方面，本發(fā)明提供了一種分離的淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum)菌株，即MN12228，其保藏編號為CGMCC No.12773，于2016年7月12日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號北京微生物研究所。

本發(fā)明提供了分離的淡紫紫孢菌菌株，其具有與SEQ ID NO.1有至少99.5％、至少99.55％、至少99.6％、至少99.65％、至少99.7％、至少99.75％、至少99.8％、至少99.85％、至少99.9％、至少99.95％或100％同一性的序列，并且其中當用所述淡紫紫孢菌菌株處理作物植物時，所述淡紫紫孢菌菌株賦予所述作物植物正面的農業(yè)性狀或益處。

正面的農業(yè)性狀或益處是相對于對照植物而言，根結線蟲造成的疾病或癥狀得到預防、治療、嚴重程度得到緩解，例如根結減少，出芽率提高，根系生長更加旺盛，土壤線蟲明顯減少，其中包括根結線蟲、孢囊線蟲、金色線蟲、異皮線蟲等植物寄生線蟲。這類正面的農業(yè)性狀或益處可以包括植物生長增加、作物植物產量增加、質量提高。

在一些實施方式中，其中分離的淡紫紫孢菌菌株是本文提供的淡紫紫孢菌菌株MN12228的子代。

在一些實施方案中，提供淡紫紫孢菌菌株或其分離株的培養(yǎng)物或群體。

第二方面，提供了一種組合物，其包含本文第一方面的菌株和農業(yè)上可接受的載劑。