[發(fā)明專利]抗甲型流感病毒的抗體和檢測甲型流感病毒的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010832221.0
• 申請日: 2020-08-18
• 公開（公告）號: CN114075277B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 崔鵬;何志強;孟媛;鐘冬梅;唐麗娜;何雯雯;羅沛
• 申請（專利權(quán)）人: 東莞市朋志生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;G01N33/569;G01N33/58;G01N33/558
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 周文波

本發(fā)明公開了一種抗甲型流感病毒的抗體和檢測甲型流感病毒的試劑盒，涉及抗體技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開的抗甲型流感病毒的抗體包括重鏈互補決定區(qū)：CDR?VH1?3和輕鏈互補決定區(qū)：CDR?VL1?3。該抗體對甲型流感病毒抗原的親和力較好，使用該抗體檢測甲型流感病毒具有較好的靈敏度和特異性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗體技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種抗甲型流感病毒的抗體和檢測甲型流感病毒的試劑盒。

背景技術(shù)

流行性感冒病毒(Influenza virus，F(xiàn)lu)，簡稱流感病毒，是正粘病毒科的代表種，包括人類流感病毒、豬流感病毒、馬流感病毒、禽流感病毒等，其中人流感病毒根據(jù)其核蛋白的抗原性可分為甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，是流行性感冒的病原體。流感病毒可引起人、禽、豬、馬、蝙蝠等多種動物感染和發(fā)病。其中可感染人主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒，主要引起上呼吸道的感染，也可引起兒童與成年人的下呼吸道感染，主要為肺炎，嬰幼兒的重癥流感常伴有支氣管、高熱。

甲型流感病毒(Influenza A，F(xiàn)lu-A)于1933年分離成功，其抗原易發(fā)生變異，可以進一步分為H1N1、H3N2、H5N1、H7N9等亞型(H代表流感病毒的血凝素、N代表流感病毒的神經(jīng)氨酸酶)，多次引起世界性大流行，每年均有一個高峰。甲型流感病毒感染發(fā)病程度與個人免疫相關(guān)，典型癥狀以畏寒、持續(xù)高熱、頭痛為主，同時伴有喉痛、咳嗽、鼻塞，一般會有渾身酸痛、乏力等全身癥狀。文獻報道流行期陽性檢出率為20～40％，而在非流行季節(jié)的陽性率為2-20％。甲型流感病毒的持續(xù)性流行會給人們的健康、生活及社會公共防疫系統(tǒng)帶來極大的干擾和壓力，它已經(jīng)成為流行病學的主要研究對象之一。

目前市場上針對甲型流感病毒的檢測方法主要有熒光PCR法、免疫法、病毒分離培養(yǎng)鑒定。熒光PCR法是在PCR擴增過程中，通過熒光信號，對PCR進程進行實時檢測，定性或定量檢測目的，該方法是病原檢測的金標準；免疫法是通過抗原抗體發(fā)出特異性結(jié)合來檢測目的蛋白；病毒分離培養(yǎng)常用的方法有雞胚接種、動物接種、組織(細胞)培養(yǎng)等，再對產(chǎn)生的結(jié)果進行觀察分析。熒光PCR法雖有較好的靈敏度和特異性，其檢測窗口期較短，為疫病的早診斷、早治療、降低死亡率及控制疫情爭取時間，可作為診斷的金標準。但該法對檢測人員要求較高，需要經(jīng)過專業(yè)的技能培訓，診斷檢測需在具備資質(zhì)的專業(yè)實驗室使用專業(yè)的儀器設(shè)備才能進行，因此該法并不適用于臨床或流行病監(jiān)測一線的快速診斷。病毒分離培養(yǎng)鑒定檢測耗時較長，環(huán)境要求高，操作者的感染風險大，培養(yǎng)效果差，在臨床診斷和流行病監(jiān)測等方面的應(yīng)用非常有限。免疫法檢測試劑針對的是樣品中的抗原或者抗體，檢測速度較快，準確性較好，同時對實驗室與操作人員要求較低，普遍適用于醫(yī)院檢驗科、疾控系統(tǒng)實驗室等基層篩查，對甲型流感的初始檢測、在醫(yī)院及社區(qū)中成功控制爆發(fā)和指導治療具有非常重要的作用。

目前市場上針對甲型流感的免疫診斷試劑產(chǎn)品主要有酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)、膠體金免疫層析法，如廣州萬孚的甲型流感病毒抗原檢測試劑(膠體金法)、RD的甲型流感ELISA試劑盒等。以上各種診斷試劑產(chǎn)品中，均需要針對甲型流感病毒的特異性抗體，目前市場上針對甲型流感病毒的特異性抗體在特異性及靈敏度均存在一定的缺陷。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種抗甲型流感病毒的抗體和檢測甲型流感病毒的試劑盒，該抗體對甲型流感病毒抗原的親和力較好，使用該抗體檢測甲型流感病毒具有較好的靈敏度和特異性。

本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：

一方面，本發(fā)明提供一種抗甲型流感病毒的抗體或其功能性片段，所述抗體或其功能性片段具有如下互補決定區(qū)：

CDR-VH1(重鏈互補決定區(qū)1)：G-X1-T-F-T-X2-Y-S-M-X3；其中：X1是Y或F；X2是E或D；X3是Q、N或H；