[發明專利]靶向c-Met基因的siRNA分子及其應用

在審

• 申請號: 202010824358.1
• 申請日: 2020-08-17
• 公開（公告）號: CN111849992A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 陳莉;王桂蘭;周家名;秦婧;顧王露
• 申請（專利權）人: 南通大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/713;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了一組靶向c?Met基因的siRNA分子及其應用，屬于生物醫藥技術領域。該siRNA分子由正義鏈和反義鏈組成，體外實驗證明，本發明的siRNA分子的反義鏈可特異性地與抑制c?Met基因的mRNA結合，降解mRNA，從而干擾轉錄后翻譯過程，誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞轉移和侵襲，達到治療腫瘤的目的。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體涉及一組靶向c-Met基因的siRNA分子及其應用。

背景技術

原發性肝癌特別是肝細胞肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)，是最常見的肝臟原發性腫瘤，其發病率及病死率有逐步升高的趨勢。目前其全球發病率在所有惡性腫瘤中居第五，而癌癥死亡率高居第三位，每年約有80萬人死于肝細胞癌。全球每年肝癌新發病例有一半左右發生在我國，列我國癌癥死因第二位，嚴重危害國民健康。肝癌的惡性程度較高，發病隱匿，早期診斷困難，進展較快，確診時大多數患者已達到中晚期伴有廣泛浸潤或發生遠處轉移，不能手術切除。導致肝癌預后不佳的一個重要原因就是缺乏有效的治療手段，因此除強調和重視早期發現、早期治療外，探索有效的治療方法對改善肝癌患者的預后具有重要意義。

c-Met基因位于人類7號染色體長臂(7q31)，大小約110kb，包括21個外顯子，啟動子區域有許多調控序列，如IL-6和HGF等。在不同組織和細胞系中c-Met的轉錄產物有多種，各種轉錄產物的功能尚不清楚，但某些轉錄產物只在特定的癌組織中出現，因此，這些轉錄產物可能與特定組織的癌變有關。研究顯示，c-Met在非小細胞肺癌、胃癌、腦癌、乳腺癌、結直腸癌、肝癌等多種常見惡性腫瘤中都能檢測被異常激活。近年來，諾華、默克等藥物公司以c-Met為靶點的抑制劑在治療肺癌上有突破性進展，由于肺癌和胃癌等在我國頻發，故c-Met也已經成為熱門研究靶點之一。

RNA干擾(RNA interference e，RNAi)是由小干擾RNA(small interference RNA，siRNA)引發其同源信使RNA(messenger RNA，mRNA)降解的一種轉錄后基因沉默形式(Nature.1998,391:806-811)。現已被證實在多種病毒感染性疾病和腫瘤的治療中具有極大的潛力，是理想的阻斷基因表達的治療手段。RNAi技術開辟了一個全新的治療領域，目前國際上已有數十種siRNA藥物進入臨床階段。

發明內容

本發明的目的是提供一組靶向c-Met基因的siRNA分子及其應用，該siRNA分子的反義鏈可特異性地與抑制c-Met基因的mRNA結合，降解mRNA，從而干擾轉錄后翻譯過程，誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞轉移和侵襲。

為了實現上述發明目的，本發明采用以下技術方案：

靶向c-Met基因的siRNA分子，由正義鏈和反義鏈組成，其序列為：

正義鏈：5’-GGAAGAAGAUCACGAAGAUdTdT-3’(SEQ ID NO:1)，

反義鏈：5’-AUCUUCGUGAUCUUCUUCCdTdT-3’(SEQ ID NO:2)。

上述靶向c-Met基因的siRNA分子在制備抑制細胞中c-Met基因功能的藥物中的應用。

上述靶向c-Met基因的siRNA分子在制備預防和/或治療肝癌的藥物中的應用。

進一步地，所述靶向c-Met基因的siRNA分子可以抑制肝癌細胞的遷移。

進一步地，所述靶向c-Met基因的siRNA分子可以抑制肝癌細胞的侵襲。

體外實驗證明，本發明的siRNA分子的反義鏈可特異性地與抑制c-Met基因的mRNA結合，降解mRNA，從而干擾轉錄后翻譯過程，誘導腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞轉移和侵襲，達到治療腫瘤的目的。