[發明專利]一種廣譜型微囊藻毒素酶聯免疫檢測試劑盒

有效

• 申請號: 202010823099.0
• 申請日: 2020-08-17
• 公開（公告）號: CN111912986B
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 周小紅
• 申請（專利權）人: 清華大學
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/545;G01N33/53;C07K16/44
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 王灝增

本發明涉及一種廣譜型微囊藻毒素酶聯免疫檢測試劑盒，包括包被抗原、微囊藻毒素單克隆抗體溶液以及酶標二抗；所述微囊藻毒素單克隆抗體溶液是將微囊藻毒素單克隆抗體用磷酸鹽緩沖液稀釋，再加入牛血清白蛋白和硫柳汞得到的液體。本發明的廣譜型微囊藻毒素酶聯免疫檢測試劑盒，具有對MCs異構體廣譜響應能力強、靈敏度高、分析通量大、檢測速度快、費用低廉等優點，可適用于水中、動物源淡水產品以及植物源淡水產品中微囊藻毒素總量的定量檢測。

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，特別涉及一種檢測微囊藻毒素總量的酶聯免疫檢測試劑盒。

背景技術

微囊藻毒素(Microcystins，MCs)是水華爆發時，微囊藻屬、魚腥藻屬等藍藻產生的次級代謝產物，是淡水中分布最廣泛的藍藻毒素之一。MCs是一類具有共性環狀七肽結構的小分子，由5個非蛋白原氨基酸(如脫氫丙氨酸衍生物和特殊的β-氨基酸 Adda等)和2個蛋白原氨基酸(第2位和第4位的可變氨基酸)組成，其化學結構式如式1所示。到目前為止已有超過100個微囊藻毒素異構體被報道，自然界中分布較廣的MC異構體為MC-LR、MC-RR和MC-YR(L、R、Y分別代表亮氨酸、精氨酸和酪氨酸)。

MCs化學性質穩定，能夠強烈抑制蛋白磷酸酶的活性，還是強烈的肝臟腫瘤促進劑，嚴重威脅著生態環境安全和人類健康，發展水中微囊藻毒素總量的及時準確監測技術十分迫切且重要。目前對水中微囊藻毒素的檢測技術主要有高效液相色譜、高效液相色譜-串聯質譜、酶聯免疫吸附試驗、免疫傳感器檢測以及蛋白磷酸酶抑制試驗等。常規的儀器分析技術具有準確性好、靈敏度高等優勢，但依賴于價格昂貴、占地面積大的分析儀器，且檢測費用高、對技術人員的操作要求較高等不足；更為不足的是，儀器分析技術只能通過對單個微囊藻毒素異構體進行檢測和濃度加和獲得微囊藻毒素總量濃度。由于微囊藻毒素異構體眾多，性質近似，目前尚沒有針對所有異構體建立相應的檢測條件和方法，且無法獲得一些尚未得到鑒定的微囊藻毒素濃度信息。

免疫檢測是基于抗原-抗體特異性親和反應原理建立的一種快速分析方法，通過篩選獲得針對MCs具有廣譜性識別能力的抗體，結合酶放大發展的廣譜型微囊藻毒素酶聯免疫檢測(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒具有檢測廣譜性強、靈敏度高、分析通量大、檢測速度快、費用低廉等優點，能適應大規模樣品的微囊藻毒素總量快速篩查和預警監測。目前已有的微囊藻毒素檢測試劑盒大部分只能檢測一種微囊藻毒素異構體，無法直接檢測微囊藻毒素總量。

發明內容

本發明的目的是提供一種廣譜型微囊藻毒素酶聯免疫檢測試劑盒。

本發明所提供的微囊藻毒素酶聯免疫檢測試劑盒，包括包被抗原、微囊藻毒素單克隆抗體溶液以及酶標二抗；