[發明專利]利用不同檢測溫度的靶核酸序列檢測

在審

• 申請號: 202010806475.5
• 申請日: 2014-12-09
• 公開（公告）號: CN111893171A
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 千鐘潤;李榮祚
• 申請（專利權）人: SEEGENE株式會社
• 主分類號: C12Q1/6869
• 分類號: C12Q1/6869;C12Q1/6827;C12Q1/6858;C12M1/36;C12M1/34
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 劉曉東

1.一種計算機可讀存儲介質，包含構造處理器用于執行利用不同檢測溫度確定試樣內兩種靶核酸序列的存在的方法的指示，所述方法包括：

(a)接收在相對較高檢測溫度下檢測出的信號以及在相對較低檢測溫度下檢測出的信號，其中借助相應的信號-產生裝置檢測各個上述靶核酸序列，其中所產生的信號通過使用單一類型的檢測器進行檢測；其中所述兩種靶核酸序列中的一種具有借助相應的信號-產生裝置確定的所述相對較高的檢測溫度，另一種具有借助相應的上述信號-產生裝置確定的所述相對較低的檢測溫度，上述相對較高的檢測溫度為能夠針對具有上述相對較高檢測溫度的靶核酸序列產生信號的溫度，上述相對較低檢測溫度為能夠針對具有上述相對較低檢測溫度的靶核酸序列產生信號以及針對具有上述相對較高檢測溫度的靶核酸序列產生信號的溫度；以及

(b)根據所接收的上述信號確定上述兩種靶核酸序列的存在情況，其中(i)根據在上述相對較高檢測溫度下檢測出的信號確定具有上述相對較高檢測溫度的靶核酸序列的存在，(ii)根據在上述相對較高檢測溫度下檢測出的信號以及在上述上述相對較低檢測溫度下檢測出的信號之間的差異確定具有上述相對較低檢測溫度的靶核酸序列的存在，其利用基準值，其中(i)在與上述步驟(a)中的反應容器不同的其他反應容器中與用于檢測具有上述相對較高檢測溫度的靶核酸序列的信號-產生機構一同培養具有上述相對較高檢測溫度的靶核酸序列，(ii)在上述相對較高檢測溫度以及上述相對較低檢測溫度下均檢測信號，(iii)然后通過求出在上述相對較高檢測溫度下檢測出的信號以及在上述相對較低檢測溫度下檢測出的信號之間的差異來獲得上述基準值。

2.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中在伴隨核酸擴增的信號擴增過程中檢測在相對較高檢測溫度下的信號和在相對較低檢測溫度下的信號。

3.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中在沒有核酸擴增的信號擴增過程中檢測在相對較高檢測溫度下的信號和在相對較低檢測溫度下的信號。

4.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中每個靶核酸序列的信號產生裝置是以依賴于雙鏈體形成的方式產生信號的信號產生裝置。

5.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中每個靶核酸序列的信號產生裝置是通過依賴于與靶核酸序列特異性雜交的介導寡核苷酸的切割的方式形成雙鏈體的信號產生裝置。

6.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中具有相對較高檢測溫度的所述靶核酸序列的信號產生裝置是通過裂解檢測寡核苷酸而產生信號的裝置，以及用于具有相對較低檢測溫度的靶核酸序列的信號產生裝置是通過形成雙鏈體而產生信號的裝置。

7.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中具有相對較高檢測溫度的所述靶核酸序列的信號產生裝置是通過裂解檢測寡核苷酸而產生信號的裝置，以及用于具有相對較低檢測溫度的靶核酸序列的信號產生裝置是通過依賴于與靶核酸序列特異性雜交的介導寡核苷酸的裂解的方式形成雙鏈體而產生信號的裝置。

8.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中所述兩個信號生成裝置包括相同的標簽，并且來自所述標簽的信號不通過所述單一類型的檢測器來區分。

9.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中所述差異包括通過對在所述相對較高檢測溫度下檢測到的信號和在所述相對較低檢測溫度下檢測到的信號進行數學處理而獲得的差異。

10.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中當在所述相對較高檢測溫度下沒有檢測到所述信號時，通過在所述相對較低檢測溫度下檢測到的信號來確定具有所述相對較低檢測溫度的所述靶核酸序列的存在，并考慮在所述相對較高檢測溫度下沒有檢測到信號。

11.根據權利要求1所述的計算機可讀存儲介質，其中所述兩個靶核酸序列包含核苷酸變異，并且所述兩個靶核酸序列之一包含一種類型的核苷酸變異，而另一個包含另一類型的核苷酸變異。