[發明專利]一種用于肥胖基因突變檢測的試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202010801436.6
• 申請日: 2020-08-11
• 公開（公告）號: CN111944891A
• 公開（公告）日: 2020-11-17
• 發明（設計）人: 郭惠民;康桃
• 申請（專利權）人: 浙江迪譜診斷技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 杭州宇信知識產權代理事務所(普通合伙) 33231
• 代理人: 張宇娟

1.一種用于肥胖基因突變檢測的試劑盒，所述試劑盒包括三組引物組，其中

第1組引物組包括檢測位點rs3751812、rs5219、rs17300539、rs10923931、rs3813929、rs8050136、rs283、rs1108102、rs4994、rs2605100、rs7190492、rs1801282、rs10871777、rs17782313、rs6265、rs1805081、rs9939609、rs11084753、rs16952508、rs8057044、rs2867125、rs925946、rs1052700、rs4766587、rs894160、rs4752856、rs4788102、rs17109256、rs12970134、rs9424977的中至少20個，優選至少25個，進一步優選為全部檢測位點的上下游PCR擴增引物；

第2組引物組包括檢測位點rs328、rs3774261、rs6548238、rs9939973、rs13130484、rs4854344、rs2815752、rs6232、rs1424233、rs2289487、rs3101336、rs13397165、rs10501087、rs29941、rs4712652、rs477181、rs1132896、rs11076017、rs6013029、rs1421085、rs7566605、rs4712523、rs662799、rs7191513、rs4402960、rs8044769、rs7578597、rs10913469、rs1121980、rs633265的中至少20個，優選至少25個，進一步優選為全部檢測位點的上下游PCR擴增引物；

第3組引物組包括檢測位點rs4074134、rs6234、rs3755724、rs1695、rs2304795、rs1042713、rs1042714、rs10146997、rs17700633、rs2568958、rs6499640、rs8049439、rs2229616、rs4450508、rs6235、rs7498665、rs1861868、rs10508503、rs7647305、rs10838738、rs10938397、rs7138803、rs7561317、rs4923461、rs7144011的中至少15個，優選至少20個，進一步優選為全部檢測位點的上下游PCR擴增引物。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，所述檢測位點對應的上下游PCR擴增引物：

3.根據權利要求1所述的試劑盒，所述試劑盒還包括用于對應肥胖基因位點的單堿基延伸檢測的引物。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，所述肥胖基因位點對應的單堿基延伸檢測的引物如下：

5.一種用于檢測肥胖基因位點的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括如下試劑：

(1)飛行時間質譜檢測系統核酸樣本預處理試劑：包括如下主要組分

(2)擴增反應引物預混合液：所述權利要求1中的SEQ ID NO.1～170所示的核苷酸序列的混合液，各引物濃度為0.3～3μM；

(3)單堿基延伸反應引物預混合液：所述權利要求2中的SEQ ID NO.171～255所示的核苷酸序列的混合液，各引物濃度介于3～30μM；

(4)除鹽樹脂：包括去除延伸反應液鹽離子的陽離子交換樹脂粉末；

(5)檢測芯片：包括含384個已預點基質的檢測點的硅基芯片。

6.根據權利要求5所述的用于肥胖基因突變檢測的試劑盒，其特征在于，所述擴增反應引物預混合液具體為，所述權利要求1中的SEQ ID NO.1～170所示的引物的混合液，各引物等比例混合，最終摩爾濃度均為0.5μM。

7.根據權利要求5所述的用于肥胖基因突變檢測的試劑盒，其特征在于，包括所述單堿基延伸反應引物預混合液，所述單堿基延伸引物如SEQ ID NO.171～255所示。

8.一種集成一體化的核酸質譜檢測技術平臺：飛行時間質譜檢測系統以及上述權利要求1-7中任意一項所述的試劑盒。