[發(fā)明專利]基于自組裝的可檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物、其制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010798426.1
• 申請日: 2020-08-11
• 公開（公告）號: CN111777616B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曾榮今;王勝蘭;張崇華;張培盛;陳建;成奮民
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南科技大學(xué)
• 主分類號: C07D487/22
• 分類號: C07D487/22;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 石家莊科誠專利事務(wù)所(普通合伙) 13113
• 代理人: 劉蘭芳;楊亞慧

本發(fā)明公開了一種基于自組裝的可檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物、其制備方法及應(yīng)用，該卟啉衍生物的制備方法通過以下步驟完成：卟啉母體先與二溴烷烴反應(yīng)，所得產(chǎn)物再和三乙胺反應(yīng)，得到一種卟啉衍生物。該卟啉衍生物與帶負(fù)電荷的透明質(zhì)酸鏈通過靜電自組裝的方法形成了一種新型的熒光納米傳感器。本發(fā)明的熒光納米傳感器能在水溶液中實現(xiàn)對透明質(zhì)酸酶的高選擇性檢測，相比于現(xiàn)有的檢測技術(shù)，本發(fā)明得到的熒光納米傳感器具有良好的生物相容性，制備方法簡單，選擇性高，發(fā)射波長位于近紅外能有效扣除生物背景熒光，具有良好的工業(yè)發(fā)展前景，在分析化學(xué)、生命科學(xué)等技術(shù)領(lǐng)域有著巨大的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)材料及分析檢測領(lǐng)域，具體地說，本發(fā)明涉及可用于檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物的制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

透明質(zhì)酸(Hyaluronic?acid，HA)含有多個重復(fù)的葡糖醛酸與N-乙酰葡糖胺二糖單元，呈負(fù)電荷分布，具有良好的水溶性,是構(gòu)成細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular?matrix,ECM)和細(xì)胞間質(zhì)(intercellularmatrix，ICM)的主要成分。透明質(zhì)酸酶(hyaluronidase,HAase)是HA的專一性水解酶，是一種內(nèi)糖苷酶，可直接水解透明質(zhì)酸的β-1,4糖苷鍵，最終生成的產(chǎn)物主要為四糖的代謝物，多年來其一直作為化療的輔助藥物來增強(qiáng)藥物的滲透性。據(jù)報道，HAase與許多生理和病理過程有關(guān)，在膀胱癌、前列腺癌、腦癌、直腸癌等惡性腫瘤中均有高表達(dá)。因此，HAase作為一種新型的腫瘤標(biāo)志物，受到了廣泛的關(guān)注，設(shè)計合成一種可檢測HAase的傳感器對早期癌癥的臨床診斷和治療具有重要意義。

現(xiàn)有技術(shù)中HAase的檢測方法主要包括:濁度法、粘度法、酶譜法、免疫分析法、比色法、化學(xué)發(fā)光輔助法和熒光傳感法。其中，熒光傳感法因其操作簡單、損失小和靈敏度高等優(yōu)點而得到廣泛的應(yīng)用。熒光傳感法主要依賴于熒光傳感器的標(biāo)記來檢測HAase，而傳統(tǒng)的熒光傳感器主要分為有機(jī)小分子熒光傳感器和熒光納米傳感器，其中，有機(jī)小分子熒光傳感器大多數(shù)水溶性差，在使用過程中需要利用大量有機(jī)溶劑作助溶劑，從而導(dǎo)致有機(jī)小分子熒光傳感器毒性強(qiáng)、光穩(wěn)定性差；而熒光納米傳感器雖然具有更好的水分散性、生物相容性以及更高的光穩(wěn)定性，但卻存在抗干擾能力差的缺點。現(xiàn)有技術(shù)中大多數(shù)的熒光傳感器由于在紫外-可見光范圍內(nèi)具有吸收和發(fā)射，容易引起較高的生物背景熒光干擾，導(dǎo)致較低的信噪比。因此，研制能有效克服傳統(tǒng)熒光傳感法缺點的有機(jī)分子及相應(yīng)的熒光傳感器是具有相當(dāng)重要的現(xiàn)實意義和應(yīng)用前景。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的以上不足，本發(fā)明旨在提供一種基于自組裝的可檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物及其制備方法，其中，卟啉衍生物作為熒光傳感器的熒光發(fā)色團(tuán)，用以解決生物背景熒光干擾問題；本發(fā)明還涉及一種基于自組裝的可檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物的應(yīng)用，將該種卟啉衍生物與帶負(fù)電荷的透明質(zhì)酸鏈制備成熒光納米傳感器，以達(dá)到快速有效的識別透明質(zhì)酸酶的目的。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明一種基于自組裝的可檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物，所述卟啉衍生物的通式為：

其中，R1,R2,R3分別為H或O(CH₂)_n?N(CH₂CH₃)₃⁺；所述O(CH₂)_n?N(CH₂CH₃)₃⁺中的n=2~24。

一種基于自組裝的可檢測透明質(zhì)酸酶的卟啉衍生物的制備方法，其制備方法為依次進(jìn)行的以下步驟：