[發(fā)明專利]一種提高牡丹鱗芽生根率的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010797789.3 | 申請日： | 2020-08-10 |
| 公開（公告）號： | CN111903522A | 公開（公告）日： | 2020-11-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張改娜;史國安;張林杰;郭葳 | 申請（專利權(quán)）人： | 河南科技大學(xué) |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 洛陽公信知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙) 41120 | 代理人： | 時亞娟 |
| 地址： | 471000 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 提高 牡丹 生根 方法 | ||
本發(fā)明涉及一種提高牡丹鱗芽生根率的方法，屬于組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，本發(fā)明是在牡丹鱗芽增殖階段，提高培養(yǎng)基中微量元素的含量水平，能促進鱗芽生長，降低繼代培養(yǎng)時鱗芽葉黃死亡的頻率，在生根階段，使牡丹鱗芽基部熱激處理后，在改良的MS培養(yǎng)基和植物生長調(diào)節(jié)劑IBA、6?BA、NAA和維生素B12刺激及暗培養(yǎng)綜合處理的情況下，實現(xiàn)高效生根。該方法適合牡丹快繁，為牡丹切花品種和油用品種的快速繁殖和遺傳育種等遺傳操作誘導(dǎo)新品種奠定基礎(chǔ)。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一種提高牡丹鱗芽生根率的方法。
背景技術(shù)
芍藥科芍藥屬植物牡丹，作為我國的傳統(tǒng)名花，集觀賞、藥用于一身，近年來牡丹切花事業(yè)發(fā)展良好，同時又發(fā)現(xiàn)‘鳳丹白’等牡丹品種種子含油量高，且品質(zhì)優(yōu)，被定位為高端食用油，在洛陽、河南、乃至全國，如西藏等地大量種植。牡丹的大面積種植不僅帶動一方的旅游事業(yè)，同時也帶動了地方經(jīng)濟的快速發(fā)展。因此，對其進行品質(zhì)育種的研究，提高其質(zhì)量，發(fā)展我們的優(yōu)勢產(chǎn)業(yè)就顯得尤為重要。但是，牡丹因周期長、遺傳背景復(fù)雜等原因，使得傳統(tǒng)育種耗時長、目的性差、選擇效率低、更新慢，造成牡丹育種現(xiàn)狀不能滿足人民群眾對牡丹特色市場的日益增長的需求。因此，在繼續(xù)重視傳統(tǒng)育種的同時，創(chuàng)新并應(yīng)用迅速發(fā)展的組織培養(yǎng)技術(shù)和轉(zhuǎn)基因技術(shù)進行其品質(zhì)改良已經(jīng)迫在眉睫。目前國內(nèi)牡丹快繁的研究，多采用的是鱗芽，但是牡丹鱗芽培養(yǎng)一段時間或者繼代培養(yǎng)時黃葉甚至根上部分逐漸死亡的情況多有發(fā)生，也有采用子葉和下胚軸及葉片快繁的，在這些研究中，牡丹生根困難，始終是一個瓶頸問題。
發(fā)明內(nèi)容
為了解決現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種提高牡丹鱗芽生根率的方法。本發(fā)明采用改良后的培養(yǎng)基，牡丹生根時，采用了熱激處理、培養(yǎng)基中添加B12等及接種后采用了黑暗預(yù)處理等附加條件，使牡丹鱗芽生根率達(dá)到了60%以上。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的具體方案為：
一種提高牡丹鱗芽生根率的方法，包括以下步驟：
步驟一、取牡丹年前10月份至年后2月份的花芽，去除表面鱗片后，常規(guī)滅菌，獲得無菌鱗芽；
步驟二、將步驟一所得無菌鱗芽接種于鱗芽增殖培養(yǎng)基中，在25℃±2℃、2000xl光照、16h/d的條件下進行增殖培養(yǎng)30天；所述鱗芽增殖培養(yǎng)基為含有0.2-1.0mg/L 6-BA的改良MS固體培養(yǎng)基或改良WPM固體培養(yǎng)基中；
步驟三、將經(jīng)步驟二增殖培養(yǎng)后的鱗芽基部膨大部分剪切去除，然后將鱗芽基部在40℃水浴中熱激1-3min，接種于鱗芽生根培養(yǎng)基中，先黑暗條件下培養(yǎng)1-2周后，移到光照培養(yǎng)條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：25℃±2℃、2000xl光照、16h/d，培養(yǎng)35d；所述鱗芽生根培養(yǎng)基為1/2 MS改良的固體培養(yǎng)基，其中還含有5-6 mg/L 的IBA、0.1-0.5 mg/L的NAA、0.2-0.5mg/L的6-BA、0.5 g/L的AC、質(zhì)量百分濃度為1%的B12、質(zhì)量百分濃度為2.5%的蔗糖和質(zhì)量百分濃度為0.65%的瓊脂；
步驟二中所述鱗芽增殖培養(yǎng)基和步驟三中所述鱗芽生根培養(yǎng)基中Ca2+濃度加倍，Mn2+、Zn2+、Mo6+和Cu 2+的含量分別為55.75mg/L、1030 mg/L 、30mg/L和3mg/L。
作為對上述方案的更進一步優(yōu)化，步驟二中所述鱗芽增殖培養(yǎng)基和步驟三中所述鱗芽生根培養(yǎng)基中Ca2+濃度均為6 mmol/L。
有益效果：
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于河南科技大學(xué)，未經(jīng)河南科技大學(xué)許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202010797789.3/2.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
