[發(fā)明專利]抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010795032.0
• 申請日: 2020-08-10
• 公開（公告）號: CN111892656B
• 公開（公告）日: 2021-02-19
• 發(fā)明（設計）人: 焦順昌;陳靜遠;梁皓
• 申請（專利權）人: 北京鼎成肽源生物技術有限公司;焦順昌
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28;C12N15/13;C12N15/85;C12N5/10
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 呂紀濤

本發(fā)明提供了抗人c?Met人鼠嵌合單克隆抗體及其應用，屬于酶聯(lián)免疫技術領域，所述靶向c?Met的人鼠嵌合單克隆抗體的1D20重鏈可變區(qū)、1D20輕鏈可變區(qū)、3C36重鏈可變區(qū)、3C36輕鏈可變區(qū)、3D36重鏈可變區(qū)、和3D36輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列依次如SEQ ID No.1～6所示。本發(fā)明提供的靶向c?Met的人鼠嵌合單克隆抗體能夠與c?Met以高親和力特異性結合，并嵌合了人抗體恒定區(qū)，在人體內(nèi)應用時相比于鼠單克隆抗體可產(chǎn)生更加輕微的免疫排斥反應，提高產(chǎn)品的應用價值。

技術領域

本發(fā)明屬于酶聯(lián)免疫技術領域，尤其涉及抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體及其應用。

背景技術

肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)是一種多肽生長因子，具有強促分裂、誘導上皮細胞遷移、侵襲以及誘導血管生成等作用，其生物學活性由其受體c-Met所介導。C-Met是一種由C-Met原癌基因編碼的蛋白產(chǎn)物，具有酪氨酸激酶活性，與多種癌基因產(chǎn)物和調(diào)節(jié)蛋白相關，參與細胞信息傳導、細胞骨架重排的調(diào)控，是細胞增殖、分化和運動的重要因素。目前認為，C-Met與多種癌的發(fā)生和轉(zhuǎn)移密切相關，許多腫瘤病人在其腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移過程中均有C-Met過度表達和基因擴增。

HGF和c-Met在肺癌的形成和演進中起著至關重要的作用，因此，當異常活化的HGF/Met信號通路被阻斷時，腫瘤細胞就會出現(xiàn)形態(tài)改變、增殖減緩、成瘤性降低、侵襲能力下降等一系列的變化，提示HGF/c-Met是一個在腫瘤治療中有效的分子靶點。

單克隆抗體可直接用于人類疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究，為人類惡性腫瘤的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊前景。鼠源抗體能夠被人體免疫系統(tǒng)識別，引起人抗鼠抗體反應，使得單抗藥物療效減弱，并且引起嚴重的不良反應。嵌合抗體用人源的抗體產(chǎn)生基因的恒定區(qū)序列來代替小鼠相應的抗體基因的恒定區(qū)序列，大大的降低了鼠源抗體產(chǎn)生的免疫原性反應，使抗體的70％成分都是人成分，避免單抗分子被免疫系統(tǒng)當作異源蛋白而被快速清除，提高單抗藥物的藥效。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體及其應用，本發(fā)明提供的抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體能夠與c-Met以高親和力特異性結合，并嵌合了人抗體恒定區(qū)，在人體內(nèi)應用時相比于鼠單克隆抗體可產(chǎn)生更加輕微的免疫排斥反應，提高產(chǎn)品的應用價值，有機會應用到c-Met高表達腫瘤疾病的診斷與治療中。

為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術方案：

本發(fā)明提供了抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體，所述抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體的1D20重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，1D20輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，3C36重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，3C36輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，3D63重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，3D63輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

優(yōu)選的，所述1D20重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID No.7所示。

優(yōu)選的，所述1D20輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示。

優(yōu)選的，所述3C36重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示。

優(yōu)選的，所述3C36輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID No.10所示。

優(yōu)選的，所述3D63重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID No.11所示。

優(yōu)選的，所述3D63輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如SEQ ID No.12所示。

本發(fā)明還提供了一種重組表達載體，包含上述技術方案所述的抗人c-Met人鼠嵌合單克隆抗體的重鏈可變區(qū)和/或輕鏈可變區(qū)；