[發明專利]一種特異識別乳腺浸潤性導管癌血清的核酸適配體IDC-31分子探針及應用

在審

• 申請號: 202010789793.5
• 申請日: 2020-08-07
• 公開（公告）號: CN111876424A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 栗坤;高悅;石明;劉志偉;王朝霞
• 申請（專利權）人: 燕山大學
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;G01N33/574;A61K47/26
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 周媛媛;李馨

本發明公開了一種特異識別乳腺浸潤性導管癌血清的核酸適配體IDC?31分子探針及應用，屬于分子生物醫學領域。所述核酸適配體IDC?31的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發明設計的IDC?31特異性的序列，采用5’端或3’端修飾、標記(如同位素、生物素、熒光素或者地高辛等)的方法能夠特異識別乳腺浸潤性導管癌血清。IDC?31作為探針分子或者檢測指標，用于乳腺浸潤性導管癌的輔助診斷、治療或者監測預后的基礎研究等，作為非侵入性的檢測分子，適用于臨床乳腺浸潤性導管癌血清標本的輔助診斷、腫瘤生物導向治療。本發明的方法簡單，迅速，靈敏，具有廣泛臨床應用和基礎應用前景。

技術領域

本發明涉及一種特異識別乳腺浸潤性導管癌血清的核酸適配體IDC-31分子探針及應用，屬于分子生物醫學領域。

背景技術

乳癌腺是女性最常見的惡性腫瘤之一，在過去20多年中，全球乳腺癌絕對數量上升1.4倍，世界上大多數國家和地區乳腺癌的發病率上升了30％～40％。浸潤性乳腺癌是一組具有累及周圍組織和轉移到其他部位傾向的上皮性腫瘤，根據其不同形態學表型、預后及臨床特征分為不同組織學類型，其中最常見的是浸潤性導管癌，占50％～80％。由于腫瘤具有易擴散的特點，所以早期對疾病作出診斷，從而盡快進行相應的治療是降低其死亡率的重要方法之一。尤其乳腺癌具有腫瘤隱匿性高、患者臨床癥狀不明顯等特點，并且乳腺癌的治療主要基于疾病的病理分期及分型，故早期診斷分型、確定治療方案就顯得尤為重要。

核酸適配體作為一類新型的疾病診斷和治療分子探針，近年來受到了廣泛關注。核酸適配體是用指數富集的配體系統進化技術(Systematic evolution of ligands byexponential enrichmen，SELEX)在體外篩選獲得的單鏈寡核苷酸(DNA或RNA)，借其自身形成的空間結構與靶標分子特異性識別，又被稱為化學抗體。與傳統的抗體探針相比，適配體具有許多明顯的優勢，如易于合成和修飾、沒有免疫原性、長期穩定性、快速組織滲透和不同批次之間的低變異性。由于這些優點，適配體在臨床診斷、藥物開發和治療中顯示出巨大的應用前景。尤其是近年來改進的靶標消減SELEX技術，通過引入消減靶標去除與共有靶標分子結合的寡核苷酸，使得對未知靶分子的復合靶標進行篩選成為可能，并能以該寡核苷酸分子為探針反過來對差異靶分子進行研究，這就為開發新型分子探針以及鑒定生物標志物開辟了新的途徑。

目前，針對癌癥相關的核酸適配體的研究靶標主要是已知的腫瘤標志物或者癌細胞，然而由于蛋白和細胞的非天然結構，使篩選得到的核酸適配體在臨床應用中受到了很大限制。故本發明直接以臨床乳腺浸潤性導管癌血清為靶標，篩選乳腺浸潤性導管癌血清核酸適配，在未知血清蛋白的情況下，通過靶標消減SELEX技術獲得了一個核酸適配體IDC-31。經驗證，IDC-31與乳腺浸潤性導管癌血清有很好的親和力，并能夠特異識別乳腺浸潤性導管癌血清，且能區分正常血清與其他癌癥血清，目前尚未見能特異結合乳腺浸潤性導管癌血清的核酸適配體的相關研究報道。

發明內容

針對現有技術的不足，本發明提供了一種特異識別乳腺浸潤性導管癌核酸適配體IDC-31的序列，具有良好的親和力和特異性，作為非侵入性的檢測分子，適用于臨床乳腺浸潤性導管癌血清標本的輔助診斷、腫瘤生物導向治療，以及IDC-31作為載體遞送藥物靶向乳腺浸潤性導管癌細胞方面的應用。

本發明提供了一種核酸適配體IDC-31，所述核酸適配體IDC-31的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

進一步地，上述技術方案中，所述核酸適配體IDC-31可以特異識別乳腺浸潤性導管癌血清。

進一步地，上述技術方案中，所述核酸適配體IDC-可以是體外化學合成的，也可以是通過PCR或其他分子生物學方法制備的。

進一步地，上述技術方案中，所述核酸適配體IDC-的5’端或3’端可以經同位素、生物素、地高辛、熒光物質或者納米材料進行標記。