[發明專利]牛免疫球蛋白（IgG）雙抗體夾心膠體金免疫層析試紙條、制備方法、試劑盒和檢測方法

在審

• 申請號: 202010789121.4
• 申請日: 2020-08-07
• 公開（公告）號: CN111896750A
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 邵儷黎;趙啟皓;許叢文;王宏;陳宗倫;蔡菁華;戴仙兵;黃佳娟;鐘文茵
• 申請（專利權）人: 杭州都林生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/532
• 代理公司: 杭州凱知專利代理事務所(普通合伙) 33267
• 代理人: 金國棟

本發明提供了一種牛免疫球蛋白(IgG)雙抗體夾心膠體金免疫層析試紙條、制備方法、試劑盒和檢測方法。膠體金免疫層析試紙條，其特征是，包括底板、以及重疊設置在PVC底板上的吸水墊、層析膜、結合物釋放墊和樣品墊，結合物釋放墊上包被有膠體金標記的牛免疫球蛋白抗體a復合物，層析膜上設有一條檢測線和一條質控線，所述檢測線包被有抗牛免疫球蛋白抗體b，所述質控線包被有羊抗鼠IgG。本發明同時提供了所述層析試紙條的制備方法，和包括該試劑條的試劑盒，以及該試劑盒進行檢測的方法。本發明的技術方案基于雙抗體夾心膠體金顯色以及金標免疫分析儀定量的原理制成，可用來快速定量檢測牛免疫球蛋白(IgG)含量。

技術領域

本發明涉及檢測試劑條、試劑盒領域，尤其涉及一種牛免疫球蛋白(IgG) 雙抗體夾心膠體金免疫層析試紙條，該試劑條的制備方法，和包括該試劑條的試劑盒，以及該試劑盒進行檢測的方法。

背景技術

免疫球蛋白Ig是機體免疫系統中的重要組成部分，普遍存在哺乳動物的血液、乳汁、初乳及淋巴液中，一般分為IgG、IgA、IgD、IgM、IgE等五大類。隨著對牛免疫球蛋白的分離技術不斷進步，人們對牛免疫球蛋白的生物學功能認識也不斷深入，其富含優質蛋白、維生素和礦物質等營養元素，可以調節動物的免疫功能，增強機體抵抗力，因此在食品中的應用也越來越廣泛，從牛乳中分離的牛免疫球蛋白(IgG)已經成為嬰幼兒配方奶粉及各種乳制品、保健品的重要添加成分。由于IgG的含量直接決定了各種配方產品的質量和價格，因此對此類產品中的牛免疫球蛋白(IgG)含量的檢測極為重要。

目前，用來檢測牛免疫球蛋白(IgG)含量的方法主要分為儀器方法和免疫學方法兩大類，儀器法主要包括紫外分光光度法，電泳法和高效液相色譜法，儀器法都具有檢測準確率高，可重復的特點，但是儀器法耗時長，對設備和人員的要求高；免疫學檢測方法主要包括酶聯免疫分析法(ELISA)、免疫雙向擴散法、熒光免疫分析法，想較于儀器方法，免疫學檢測方法具有檢測通量高，方便的特點，但是靈敏度不高、步驟復雜，膠體金免疫層析法由于其快速方便，檢測結果直觀的特點，已被廣泛應用于藥物和疾病檢測領域，在對樣品進行前處理后，只需10-15min，即可得到檢測結果，結合檢測儀，更是可以對樣品的含量進行定量，在牛免疫球蛋白(IgG)檢測領域，未見膠體金檢測方法的報道。

發明內容

本發明是為了克服現有技術中的牛免疫球蛋白(IgG)檢測領域的上述不足之處，且無法實現高通量處理的不足之處，提供一種牛免疫球蛋白(IgG)雙抗體夾心膠體金免疫層析試紙條、制備方法、試劑盒和檢測方法，可對樣品中的牛免疫球蛋白實現快速定量檢測，極大的縮短了檢測時間，并可實現大批量樣品的快速準確篩查。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

本發明的一種牛免疫球蛋白(IgG)雙抗體夾心膠體金免疫層析試紙條，包括底板、以及重疊設置在底板上的吸水墊、層析膜、結合物釋放墊和樣品墊，結合物釋放墊上包被有膠體金標記的牛免疫球蛋白抗體a復合物，層析膜上設有一條檢測線和一條質控線，所述檢測線包被有抗牛免疫球蛋白抗體b，所述質控線包被有羊抗鼠IgG。

作為優選，層析膜上的檢測線包被有濃度為0.5-2mg/mL的抗牛免疫球蛋白抗體b，層析膜上的質控線包被有濃度為0.5-1mg/mL的羊抗鼠IgG。

作為優選，所述抗牛免疫球蛋白抗體a和抗牛免疫球蛋白抗體b同為抗牛免疫球蛋白單克隆抗體或抗牛免疫球蛋白多克隆抗體或抗牛免疫球蛋白重組抗體中的一種。

作為優選，所述抗牛免疫球蛋白抗體a和抗牛免疫球蛋白抗體b同為抗牛免疫球蛋白單克隆抗體。