[發明專利]一種促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法在審
| 申請號： | 202010788643.2 | 申請日： | 2020-08-07 |
| 公開（公告）號： | CN111850048A | 公開（公告）日： | 2020-10-30 |
| 發明（設計）人： | 趙荷艷;張蕾 | 申請（專利權）人： | 南通大學 |
| 主分類號： | C12N15/867 | 分類號： | C12N15/867;C12N15/113;C12N5/0797 |
| 代理公司： | 南京瑞弘專利商標事務所(普通合伙) 32249 | 代理人： | 徐激波 |
| 地址： | 226019 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 促進 海馬 神經 干細胞 膽堿能 神經元 分化 方法 | ||
1.一種促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：包括，
分離海馬NSCs，接種后用NSCs培養液培養，加入病毒，一定時間后撤去更換新鮮的NSCs培養液繼續培養。
2.如權利要求1所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述病毒為GAS5過表達慢病毒。
3.如權利要求2所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述加入病毒，其MOI值為5～100。
4.如權利要求1所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述一定時間，其為16h。
5.如權利要求1所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述接種，其為接種于培養板、培養瓶中的一種或幾種，接種密度為5×104個/孔和/或1×106/ml。
6.如權利要求1～5任一所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述分離海馬NSCs，其步驟包括，
分離胚鼠海馬原基，離心后棄上清；
加入NSCs培養液，過濾得到細胞懸液；
將所述細胞懸液接種培養，然后經胰蛋白酶消化；
加入NSCs培養液，培養即得海馬NSCs。
7.如權利要求6所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述離心，其為在1200rpm條件下離心5min。
8.如權利要求7所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：所述離心需進行多次。
9.如權利要求7或8所述的促進海馬神經干細胞向膽堿能神經元分化的方法，其特征在于：GAS5表達量顯著提升。
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