[發(fā)明專利]一種超聲波輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法

有效

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• 申請日: 2020-08-07
• 公開（公告）號: CN111919987B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陶陽;王紅梅;韓永斌;李丹丹
• 申請（專利權(quán)）人: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A23L2/38
• 分類號: A23L2/38;A23L2/70;C12N13/00;C12N1/20;C12R1/25
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責(zé)任公司 32218
• 代理人: 吳爽;徐冬濤

1.一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，以植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）為出發(fā)菌種，具體步驟如下：

（1）制備種子培養(yǎng)基和蘋果汁；

（2）將植物乳桿菌接種于種子培養(yǎng)基活化菌種；

（3）將活化后的菌種接種到蘋果汁中，測定其生長曲線；

（4）將活化后的菌種接種到蘋果汁中，超聲波處理，再將處理后的蘋果汁繼續(xù)培養(yǎng)得到發(fā)酵蘋果汁產(chǎn)品；

其中，所述步驟（1）蘋果汁的制備方法如下：挑選性狀優(yōu)良、果實成熟的紅富士蘋果為原料，洗凈晾干，去除果皮和果芯，切分，用打漿機將蘋果塊破碎，破碎的同時加入質(zhì)量分數(shù)為0.1-0.5 %的D-異抗壞血酸鈉和10%的純凈水，將所得的蘋果漿液用紗布過濾去除沉淀，然后再離心取上清液得到蘋果汁，調(diào)節(jié)pH至6.0，加入0.1~0.8%的酵母浸粉后，滅菌，備用；

所述步驟（4）超聲波的處理方法和條件為：根據(jù)生長曲線的測定結(jié)果，在蘋果汁中植物乳桿菌生長的停滯期或?qū)?shù)期進行超聲波處理，超聲功率密度為93.6 W/L，超聲頻率為20kHz，超聲時間30min，超聲脈沖發(fā)聲條件為超聲5 s 間歇5 s；

其中，停滯期指接種發(fā)酵后第0h；對數(shù)期指接種發(fā)酵后第8h；

其中，所述步驟（3）和步驟（4）活化后的菌種接種到蘋果汁的步驟和條件為：將種子液以2％的接種量接種到蘋果汁中，初始菌數(shù)為7.0 Log CFU/mL，于30℃下發(fā)酵。

2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，所述步驟（1）種子培養(yǎng)基的主要成分為MRS肉湯，配制方法為：稱取市售MRS肉湯49.3 g，溶解于1 L水中，121 ℃高壓滅菌20 min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，所述紗布目數(shù)為120目。

4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，所述離心條件為：4000 r/min下離心20 min。

5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，所述滅菌條件為：85 ℃滅菌20 min。

6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，所述步驟（3）生長曲線的測定方法為：挑取植物乳桿菌接種于50 mL無菌MRS肉湯中，37 ℃培養(yǎng)24 h；將上述培養(yǎng)好的菌液按照2%的接種量接入到蘋果汁中，采用控溫細菌生長測定儀控制溫度為30℃，在600 nm下定時測定蘋果汁的吸光值；以吸光值為y軸，培養(yǎng)時間為x軸，繪制生長曲線。

7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種超聲波處理輔助植物乳桿菌發(fā)酵蘋果汁同時促進蘋果酸乳酸轉(zhuǎn)化和多酚衍化的方法，其特征在于，所述步驟（4）蘋果汁繼續(xù)培養(yǎng)的方法和條件為：將超聲波處理后的樣品放置在30℃培養(yǎng)箱中再靜置培養(yǎng)24 h。