[發(fā)明專利]一種中國被毛孢誘變株及其在生產(chǎn)核苷中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010783486.6
• 申請(qǐng)日: 2020-08-06
• 公開（公告）號(hào): CN112126592B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金利群;柳志強(qiáng);徐哲文;張博;鄭裕國
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/14
• 分類號(hào): C12N1/14;C12P19/38;C12R1/645
• 代理公司: 杭州之江專利事務(wù)所(普通合伙) 33216
• 代理人: 牛世靜

本發(fā)明公開了一種中國被毛孢誘變株及其在生產(chǎn)核苷中的應(yīng)用，該中國被毛孢誘變株命名為中國被毛孢(Hirsutella sinensis)ZJB19050，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC M 2020117，保藏日期為2020年5月11日，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)；郵編為430072。本發(fā)明利用原生質(zhì)體技術(shù)對(duì)原始中國被毛孢菌株ZJB18002進(jìn)行物理、化學(xué)等誘變方式，得到了誘變株；該誘變株的代謝產(chǎn)物尿苷產(chǎn)量提高約1.13倍，鳥苷產(chǎn)量提高0.67倍，腺苷產(chǎn)量提高1.60倍，使蟲草的生產(chǎn)成本降低，有利于中國被毛孢的廣泛推廣和應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及冬蟲夏草無性型中國被毛孢菌株篩選技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種中國被毛孢誘變株及其在生產(chǎn)核苷中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

冬蟲夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)作為重要的食用菌，是麥角菌科真菌冬蟲夏草菌寄生在鱗翅目(Lepidoptera)蝙蝠蛾科昆蟲(Hepialus armoricanusOberthur)幼蟲上的子座及幼蟲尸體上的復(fù)合體(包括子座和蟲體)。其與人參、鹿茸同被譽(yù)為中國三大名貴滋補(bǔ)中藥，有“百藥之王”的美稱。冬蟲夏草是作為名貴滋補(bǔ)藥材，其營養(yǎng)成分含有核苷、蟲草素、蟲草酸、多糖、噴斯他汀和新型類胡蘿卜素等，具有抗疲勞，抗炎，抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、特性免疫調(diào)節(jié)、降血糖血脂等廣泛的藥理作用。在臨床上對(duì)肺虛久咳，氣喘，肺結(jié)核咯血，盜汗，腎虛腰膝酸痛，陽痿遺精，神經(jīng)衰弱及化療、放療后的紅細(xì)胞下降都有療效。

冬蟲夏草菌是一種子囊菌，其在蝙蝠蛾幼蟲體內(nèi)形成菌核到長(zhǎng)出冬蟲夏草子座和子囊，這過程屬于冬蟲夏草有性型階段，此時(shí)的冬蟲夏草稱有性型。從冬蟲夏草的子囊孢子發(fā)芽成菌絲(或產(chǎn)生分生孢子——發(fā)芽成菌絲)侵染蝙蝠蛾幼蟲，到冬蟲夏草菌絲在幼蟲體內(nèi)增殖、消化吸收幼蟲體全部營養(yǎng)的過程屬冬蟲夏草菌種無性增殖階段。而在人工培養(yǎng)、液體發(fā)酵等實(shí)際生產(chǎn)中使用的是無性階段的冬蟲夏草菌，因而冬蟲夏草無性型的鑒定非常重要。經(jīng)過多年?duì)幷摚?005年10月，中國菌物學(xué)會(huì)在北京召開了《冬蟲夏草及其無性型研討會(huì)》，確定中國被毛孢(Hirsutella sinensis)為冬蟲夏草唯一無性型菌種。中國被毛孢人工發(fā)酵培養(yǎng)得到的菌絲經(jīng)藥理學(xué)和毒理學(xué)等研究，均證明與天然蟲草化學(xué)組成、藥理作用基本一致，可替代天然蟲草生產(chǎn)蟲草制品，以彌補(bǔ)自然資源的短缺。

核苷類物質(zhì)為冬蟲夏草有效成分之一，尿苷、鳥苷、肌苷和腺苷為冬蟲夏草的主要核苷類成分，其含量占總核苷量的50％以上，尤以腺苷具有明顯的藥理作用，如改善心腦血液循環(huán)、防止心律失常、抑制神經(jīng)遞質(zhì)釋放和調(diào)節(jié)腺苷酸環(huán)化酶活性等。腺苷已被用作冬蟲夏草的質(zhì)控指標(biāo)，人工蟲草的含量高于天然蟲草。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種中國被毛孢誘變株及其在生產(chǎn)核苷中的應(yīng)用，該中國被毛孢誘變株ZJB19050是運(yùn)用原生質(zhì)體技術(shù)對(duì)原始中國被毛孢菌株ZJB18002進(jìn)行物理、化學(xué)誘變而獲得，其核苷產(chǎn)量顯著高于原始菌株，尤其是腺苷、鳥苷和尿苷的含量使蟲草的生產(chǎn)成本顯著降低，有利于中國被毛孢的廣泛推廣和應(yīng)用。

具體技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供了一種中國被毛孢誘變株，命名為中國被毛孢(Hirsutellasinensis)ZJB19050，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號(hào)為CCTCC M 2020117，保藏日期為2020年5月11日，保藏地址為中國武漢，武漢大學(xué)；郵編為430072。

上述中國被毛孢誘變株由原始株ZJB18002依次經(jīng)ARTP誘變和EMS誘變獲得。與原始株ZJB18002相比，誘變株中尿苷的產(chǎn)量提高1.13倍，鳥苷產(chǎn)量提高0.67倍，腺苷產(chǎn)量提高1.6倍。原始株ZJB18002，也保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏日期2018年3月8日，保藏編號(hào)CCTCC NO.M 2018108。

具體的，所述中國被毛孢誘變株的18S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。

本發(fā)明還提供了所述的中國被毛孢誘變株在生產(chǎn)核苷中的應(yīng)用。