[發明專利]用于制備衍生自多能干細胞的去核類紅細胞的方法

在審

• 申請號: 202010783311.5
• 申請日: 2009-05-06
• 公開（公告）號: CN112280739A
• 公開（公告）日: 2021-01-29
• 發明（設計）人: R·蘭加;盧世江
• 申請（專利權）人: 安斯泰來再生醫藥協會
• 主分類號: C12N5/0789
• 分類號: C12N5/0789;C12N5/078;C12N5/071
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

1.一種產生多能干細胞衍生的去核類紅細胞的方法，包括：

提供多能干細胞；和

通過將所述多能干細胞與OP9小鼠基質細胞或人間質干細胞(MSC)一起培養而使所述多能干細胞分化為去核類紅細胞。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述多能干細胞是胚胎干細胞或胚胎衍生細胞。

3.根據權利要求1所述的方法，其中所述多能干細胞是誘導的多能干細胞。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述多能干細胞是人細胞。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述多能干細胞在分化之前經過遺傳操作。

6.根據權利要求1所述的方法，其中使所述多能干細胞分化為去核類紅細胞包括使所述多能干細胞分化為成血成血管細胞、非移植血管瘤細胞或胚細胞。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述成血成血管細胞、非移植血管瘤細胞或胚細胞在被分化為所述去核類紅細胞之前被擴增。

8.根據權利要求7所述的方法，其中所述成血成血管細胞、非移植血管瘤細胞或胚細胞在含有Epo、IL-3和SCF的Stemline II培養基中被擴增。

9.根據權利要求6所述的方法，其中所述多能干細胞是人多能干細胞，并且使所述人多能干細胞分化為所述成血成血管細胞通過包括以下的方法在體外進行：

(a)將包含人多能干細胞的細胞培養物在存在足以誘導所述人多能干細胞分化為胚狀體的量的至少一種生長因子的無血清培養基中培養；和

(b)向包含胚狀體的所述培養物添加至少兩種生長因子并繼續在無血清培養基中培養所述培養物，其中所述生長因子的量足以在所述胚狀體培養物中擴增所述人成血成血管細胞，

其中所述人多能干細胞、胚狀體和成血成血管細胞在所述方法的步驟(a)和(b)的無血清培養基中生長，并且

其中步驟(b)中所述至少兩種生長因子包括BMP4和VEGF。

10.根據權利要求9所述的方法，其中使所述人多能干細胞分化為成血成血管細胞還包括：

(c)使所述胚狀體解聚成單細胞；和

(d)向包含所述單細胞的所述培養物添加至少一種生長因子并繼續在無血清培養基中培養所述培養物，其中所述生長因子的量足以在包含所述單細胞的所述培養物中擴增人成血成血管細胞，并且

其中所述人多能干細胞、胚狀體和血管瘤集落形成細胞在所述方法的步驟(a)-(d)的無血清培養基中生長。