[發(fā)明專利]解淀粉芽孢桿菌TL106及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010779291.4
• 申請(qǐng)日: 2020-08-05
• 公開（公告）號(hào): CN111944717B
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹云鶴;鮑成玲;董冰;陸文清;王劍;張文秀
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A23K10/18;A23K10/12;A61K35/742;A61P31/04;A01N63/22;A01P3/00;C12R1/07
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 黃爽

本發(fā)明提供一株解淀粉芽孢桿菌TL106及其應(yīng)用。本發(fā)明提供的解淀粉芽孢桿菌TL106，其發(fā)酵上清液對(duì)常見食源性病原菌及植物真菌均具有廣譜抗菌活性，且經(jīng)過發(fā)酵優(yōu)化后能產(chǎn)生大量的抑菌活性物質(zhì)，可進(jìn)一步開發(fā)作為益生菌劑、促生長(zhǎng)劑或抗菌藥物，添加至飼料中用于動(dòng)物生產(chǎn)可促生長(zhǎng)或預(yù)防疾病，從而可以在一定程度減少抗生素的使用，應(yīng)用前景廣闊。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，涉及一株解淀粉芽孢桿菌TL106及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，因?yàn)E用抗生素導(dǎo)致的耐藥性致病菌株的大量增加和藥物殘留等問題引起了人們的高度重視。長(zhǎng)期大量使用抗生素引發(fā)的問題越來越嚴(yán)重，對(duì)畜禽產(chǎn)品、食品安全和人類健康造成重大威脅。因此，尋找抗生素替代品迫在眉睫，研究較多的抗生素替代品主要包括益生菌制劑、植物提取物、酸化劑和抗菌肽等。

解淀粉芽孢桿菌屬于革蘭氏陽性芽孢桿菌，其與枯草芽孢桿菌有很高的親緣性，可有效的抑制多種動(dòng)植物病原菌，包括各種細(xì)菌和真菌。其可以產(chǎn)生許多淀粉酶、蛋白酶和纖維素酶等，而且會(huì)產(chǎn)生拮抗蛋白類、脂和聚酮類化合物等豐富的抗菌活性物質(zhì)，在食品抑菌保鮮、生物醫(yī)藥和農(nóng)業(yè)生物防治領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。目前的研究已證明解淀粉芽孢桿菌可以產(chǎn)生Surfactin、Fengycin和Iturin等脂肽，以及Bacillibactin、Difficidin和Bacillaene等聚酮類物質(zhì)。芽孢桿菌產(chǎn)生的抑菌活性物質(zhì)具有抑菌活性強(qiáng)、穩(wěn)定性好以及不產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，可以作為替代替代抗生素的綠色飼料添加劑或者獸藥應(yīng)用于動(dòng)物生產(chǎn)中。芽孢桿菌的發(fā)酵工藝是產(chǎn)生抑菌活性物質(zhì)的基礎(chǔ)，發(fā)酵的環(huán)境條件如溫度、發(fā)酵時(shí)間和培養(yǎng)基的組成等都影響著抑菌物質(zhì)的產(chǎn)量和活性。

微生物發(fā)酵是利用微生物在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。微生物發(fā)酵不僅取決于菌種本身的遺傳特性，還需要適宜的培養(yǎng)基和發(fā)酵條件。優(yōu)化發(fā)酵工藝可以充分發(fā)揮菌種的潛在生產(chǎn)能力，提高生產(chǎn)效率、降低生產(chǎn)成本。本株解淀粉芽孢桿菌的抑菌活性物質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)量低，而且基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基成本較高，需要進(jìn)行發(fā)酵優(yōu)化，降低成本，提高抑菌活性物質(zhì)的產(chǎn)量。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一株具有廣譜抗菌活性的解淀粉芽孢桿菌TL106及其應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，第一方面，本發(fā)明提供從藏豬糞便中分離純化出的一株菌TL106，對(duì)多種致病菌具有抑制作用，經(jīng)鑒定，菌株TL106為解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)，現(xiàn)已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，地址北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101，保藏編號(hào)CGMCCNO.20391，保藏日期2020年7月17日。

第二方面，本發(fā)明提供含有所述解淀粉芽孢桿菌TL106的菌劑(益生菌劑)。

第三方面，本發(fā)明提供含有所述解淀粉芽孢桿菌TL106和/或其發(fā)酵產(chǎn)物的藥物或組合物。

第四方面，本發(fā)明提供所述解淀粉芽孢桿菌TL106的發(fā)酵方法，包括：裝液量為30mL/100mL，接種量為2％v/v，種子液菌齡為20h，發(fā)酵溫度為34℃，發(fā)酵時(shí)間為24h。

發(fā)酵培養(yǎng)基：碳源為蔗糖，氮源為酶解豆粕，碳、氮源總量為4％，碳、氮源的質(zhì)量比為2∶3，MnSO₄為3％，pH為7.0。

豆粕含有胰蛋白酶抑制因子、脲酶和植酸等多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，影響了其作為飼料的適口性和飼用價(jià)值，通過微生物發(fā)酵，可以改變豆粕中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的物理化學(xué)結(jié)構(gòu)，將大分子降解為容易消化吸收的小分子，清除大豆蛋白的抗原性，提高飼料轉(zhuǎn)化率。將豆粕作為培養(yǎng)基成分，進(jìn)行微生物液態(tài)發(fā)酵，可以生產(chǎn)抑菌活性物質(zhì)，以此來降低發(fā)酵成本，提高豆粕的利用效率。

優(yōu)選地，本發(fā)明中使用的酶解豆粕購自遼寧康普利德生物科技有限公司，由本公司所產(chǎn)蛋白酶發(fā)酵處理。