[發(fā)明專利]一種紫蘇PfFAD3基因在提高植物α-亞麻酸含量中的應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010777003.1
• 申請(qǐng)日: 2020-08-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113186206A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張濤;魯庚;白瑞英
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶師范大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N15/53
• 分類號(hào): C12N15/53;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11385
• 代理人: 李正

本發(fā)明提供了一種紫蘇PfFAD3基因在提高植物α?亞麻酸含量中的應(yīng)用，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，所述紫蘇PfFAD3基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述植物為擬南芥。在植物體內(nèi)過(guò)表達(dá)紫蘇PfFAD3基因，能夠顯著提高α?亞麻酸含量，過(guò)表達(dá)紫蘇PfFAD3基因的擬南芥種子含油率比野生型擬南芥種子含油率提高了7.4％?37.12％，過(guò)表達(dá)紫蘇PfFAD3基因的擬南芥亞油酸和α?亞麻酸顯著增加，亞油酸最高增加了27.54％，α?亞麻酸最高增加了44.71％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種紫蘇PfFAD3基因在提高植物α-亞麻酸含量中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

紫蘇屬于唇形科紫蘇屬[Perillafrutescens(L.)Britt]，是我國(guó)油料作物中的特種油料作物。紫蘇富含多不飽和脂肪酸，其種子油脂中ALA的含量高達(dá)60％以上，是目前發(fā)現(xiàn)的ALA含量最高的植物資源。

α-亞麻酸(ALA)屬ω-3系列多不飽和脂肪酸，為人體必需脂肪酸，是維持大腦和神經(jīng)功能所必需的因子，具有保護(hù)視力、抗血栓、降低血脂和促進(jìn)胰島素分泌等生理作用。人和哺乳類動(dòng)物缺少ω-3脂肪酸去飽和酶(ω-3FAD)基因，無(wú)法自身合成此類不飽和脂肪酸，必須從食物中獲取。目前ALA的來(lái)源主要是深海魚(yú)油，但我國(guó)深海魚(yú)油資源較為貧乏，而日常食用的植物油，如菜籽油、豆油、葵花油等，雖然含有較為豐富的亞油酸，但ALA的含量卻很低(5％左右)。在正常飲食情況下，人體往往不能足量攝入所需的ALA，致使我國(guó)人群膳食中普遍缺乏ALA，因此，挖掘和開(kāi)發(fā)富含ALA的植物資源具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種紫蘇PfFAD3基因在提高擬南芥α-亞麻酸含量中的應(yīng)用，在擬南芥體內(nèi)過(guò)表達(dá)紫蘇PfFAD3基因，能夠顯著提高擬南芥α-亞麻酸含量。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種紫蘇PfFAD3基因在提高擬南芥α-亞麻酸含量中的應(yīng)用，所述紫蘇PfFAD3基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

優(yōu)選的，所述擬南芥包括野生型擬南芥Col-0。

優(yōu)選的，在擬南芥中過(guò)表達(dá)所述紫蘇PfFAD3基因。

本發(fā)明提供了一種紫蘇PfFAD3基因提高擬南芥α-亞麻酸含量的方法，包括以下步驟：

(1)將紫蘇PfFAD3基因連接于初始載體上，獲得所述PfFAD3基因的重組載體；

(2)將步驟(1)所述的重組載體轉(zhuǎn)化到初始菌株中，獲得重組菌株；

(3)將步驟(2)所述的重組菌株通過(guò)花序侵染法轉(zhuǎn)化到擬南芥花序細(xì)胞中，獲得轉(zhuǎn)化擬南芥植株。

(4)陽(yáng)性鑒定后，獲得已成功轉(zhuǎn)入紫蘇PfFAD3基因的擬南芥植株。

優(yōu)選的，所述初始載體為pC2301M1NPB。

優(yōu)選的，所述初始菌株為根癌農(nóng)桿菌。

優(yōu)選的，所述陽(yáng)性鑒定的對(duì)象為所述轉(zhuǎn)化擬南芥植株的種子成熟后，培育得到的二代轉(zhuǎn)化擬南芥植株。

優(yōu)選的，所述培育為將所述轉(zhuǎn)化擬南芥植株的種子在培養(yǎng)基中培養(yǎng)后，移栽至基質(zhì)中生長(zhǎng)。

優(yōu)選的，所述培養(yǎng)基為含30mg/mL潮霉素的1/2MS培養(yǎng)基。

優(yōu)選的，所述陽(yáng)性鑒定為GUS染色和/或分子鑒定。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：