[發明專利]一種基于生姜試管苗的微姜塊誘導方法及應用

在審

• 申請號: 202010775729.1
• 申請日: 2020-08-05
• 公開（公告）號: CN111837959A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 袁明;李慧;姚瑄容;董維超;李龍;胡軍超
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 成都天匯致遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51264
• 代理人: 韓曉銀

本發明公開了一種基于生姜試管苗的微姜塊誘導方法，包括：將姜種室外翻曬1~2天，黑暗催芽，待姜芽長至2~3 cm，取下進行病毒鈍化處理，消毒，然后剝取帶1~2個葉原基的莖尖依次進行初代、繼代培養，獲得基礎苗；將基礎苗分成單株，切取基部1~2 cm長的莖段，形態學朝上接種到誘導培養基；將接種好的莖段進行光照培養，保持一定的溫度差，獲得生姜微型根狀莖（微姜塊）。本發明不僅利于微姜塊的誘導，也利于微姜塊的膨大，所獲得的微姜塊繁殖系數高、塊莖大、效果好。該微姜塊可以脫離母株保存并直接播種生產原原種，解決了組培姜苗需要周年化保存的問題，同時，帶微姜塊的姜苗也可以直接植入大田，成活率100%。采用微姜塊對生姜優質品種進行繁育和保存與常規的利用組織培進行離體繁育的方法相比，省去了生根壯苗和煉苗馴化環節，縮短了生姜生產周期，有效節約成本，提高了生姜繁育的經濟效益。

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，具體涉及一種基于生姜試管苗的微姜塊誘導方法及應用。

背景技術

生姜(Zingiber officinale Rosc.)又稱黃姜，是姜科姜屬多年生草本植物，在世界各地主要作為香辛調味品和中藥材廣泛種植，我國還作一年生蔬菜栽培。它是一種普遍使用的調味品，其根莖可以作為一種蔬菜單獨食用，全身皆可入藥，用于治療風濕感冒、胃寒胃痛、嘔吐腹瀉等病癥。生姜提取物具有降血壓血脂、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、增強免疫力、防治阿爾茨海默癥等功效。生姜生產市場廣闊、經濟效益好、已經成為某些地區的重要支柱產業。

種質資源的繁育和保存限制了生姜產業的進一步發展。通常通過貯存地下根莖進行繁育，繁殖系數較低，病蟲害嚴重，且由于是無性繁殖，往往致使優良品種在種植過程中受病毒侵害，品質下降、性狀衰退。另一種繁育方法是利用組織培養技術進行離體繁殖，脫毒姜苗長勢旺、產量好。但是脫毒種苗不便儲存，需要多次轉瓶維護，費時費力；脫毒得到的生產種有效期也只有3年，3年以后需要更換。組織培養誘導的微姜塊在體外也可以誘導產生無毒苗，可能替代生姜脫毒種苗，成為一種新的種質資源。但是當前報道的微姜塊生長周期較長、體積仍然比較小，遺傳穩定性差；其次是缺乏免疫力，抗逆性差，在下田后，容易被病菌感染，并不能完全滿足生姜種質保存的要求。

發明內容

有鑒于此，本發明針對現有技術存在的問題，提供了一種基于生姜試管苗的微姜塊誘導方法和應用。本發明的技術方案為：

第一個方面，本發明提供一種基于生姜試管苗的微姜塊誘導方法，包括：

步驟一，基礎苗的培育：選取姜種，將其室外翻曬1～2天后黑暗催芽，待姜芽長至2～3cm，將姜芽取下流水沖洗，然后進行鈍化病毒處理，處理完后消毒，剝取帶1～2個葉原基的莖尖依次進行初代、繼代培養，獲得基礎苗；

步驟二，接種：將基礎苗剔除根部培養基和繼代培養時接種的莖段，分成單株，切去葉、長根，保留基部1～2cm長的莖段，以形態學朝上接種到誘導培養基；

步驟三，誘導：將接種好的誘導培養基進行光照培養，獲得微姜塊。

優選地，所述步驟一中選取姜種為選取芽眼多、色澤鮮亮、健壯肥碩、無病蟲害的小黃姜。

進一步地，所述步驟一中鈍化病毒處理的條件控制為：溫度50～60℃，時間10～12min。

進一步地，所述步驟一中消毒采用的是75％酒精浸泡30～60s后，再用0.1％HgCl₂浸泡8～15min。

進一步地，所述步驟一中繼代培養的過程包括：將初代培養的叢生苗分成單株，切去葉、長根，保留2cm長的莖干接種到繼代培養基，置于25℃培養箱內培育培養30～40d，光照周期為14h/d，光照強度為3000lx。

進一步地，所述繼代培養基的組成為：以MS為基礎培養基，其中各組分的終濃度為：6-芐氨基腺嘌呤2～3mg/L，萘乙酸0.1～0.5mg/L，瓊脂6.5g/L，蔗糖30g/L。