[發(fā)明專利]美洲大蠊多肽溶液的制備方法及美洲大蠊多肽溶液

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• 申請日: 2020-08-04
• 公開（公告）號: CN111850077A
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳曉軍;楊曉磊
• 申請（專利權(quán)）人: 西安惠普生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/22;C07K1/14
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 張金銘

1.一種美洲大蠊多肽溶液的制備方法，其特征在于，包括將預處理后的美洲大蠊依次經(jīng)過醇提、酶解、水提和純化后，得到所述美洲大蠊多肽溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述預處理包括粉碎處理和/或脫脂處理；

優(yōu)選地，所述粉碎處理包括將干燥的美洲大蠊粉碎至＜60目；

優(yōu)選地，所述脫脂處理包括將美洲大蠊置于有機溶劑中進行脫脂；

優(yōu)選地，將美洲大蠊置于有機溶劑中24-30h進行脫脂；

優(yōu)選地，所述有機溶劑的用量為美洲大蠊重量的4-6倍，優(yōu)選為5倍；

優(yōu)選地，所述有機溶劑包括乙酸乙酯；

優(yōu)選地，所述脫脂次數(shù)為2-4次，優(yōu)選為3次。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述醇提包括將預處理后的美國大蠊置于有機溶劑中，在70-80℃的條件下浸提7h以上，固液分離后收集醇提液；

優(yōu)選地，所述浸提的次數(shù)為1-3次，優(yōu)選為2次；

優(yōu)選地，所述浸提的溫度為80℃，浸提的時間為7-8h，優(yōu)選為8h；

優(yōu)選地，所述有機溶劑為乙醇溶液，優(yōu)選包括70％-80％(v/v)的乙醇溶劑，更優(yōu)選包括80％(v/v)的乙醇溶劑；

優(yōu)選地，所述有機溶劑的用量為美洲大蠊重量的4-6倍，優(yōu)選為5倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述酶解包括向醇提過的蟲渣中加入胰蛋白酶溶液進行浸提，將酶滅活后固液分離，收集酶解液；

優(yōu)選地，浸提的溫度為35-45℃，浸提的時間為1.5-2.5h；

優(yōu)選地，浸提的溫度為40℃，浸提的時間為2h；

優(yōu)選地，所述胰蛋白酶溶液的用量為蟲渣質(zhì)量的4-6倍，優(yōu)選為5倍；

優(yōu)選地，所述胰蛋白酶溶液中胰蛋白酶的含量為0.2％-0.4％(w/v)，優(yōu)選為0.3％(w/v)；

優(yōu)選地，所述酶滅活的溫度為75-85℃，時間為0.5-1.5h；

優(yōu)選地，所述酶滅活的溫度為80℃，時間為1h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述水提包括向酶解后的蟲渣中加入水，浸提后固液分離，得到水提液；

優(yōu)選地，所述水提的溫度為75-85℃，時間為2.5-3.5h；

優(yōu)選地，所述水提的溫度為80℃，時間為3h；

優(yōu)選地，所述水的用量為蟲渣質(zhì)量的2-4倍，優(yōu)選為3倍。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，在純化前還包括將酶解得到的酶解液和水提得到的水提液混合并加入乙醇溶液進行醇沉，過濾后得到醇沉濾液；

優(yōu)選地，所述乙醇溶液加入后的終濃度為75％-85％(v/v)，優(yōu)選為80％(v/v)；

優(yōu)選地，加入乙醇溶液后靜置15h以上，然后過濾后得到醇沉濾液。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述的制備方法，其特征在于，在純化前還包括濃縮的步驟；

優(yōu)選地，將所述醇提液和醇沉濾液合并后減壓濃縮掉無醇味溶液體積的1/2-2/3得到濃縮液，離心后得到粗提液；

優(yōu)選地，將所述濃縮液靜置12h以上再進行離心處理；

優(yōu)選地，所述濃縮液靜置溫度為0-10℃；

優(yōu)選地，所述減壓濃縮的溫度為40-60℃，優(yōu)選為50℃；

優(yōu)選地，所述離心的轉(zhuǎn)速為5000-8000r/min，時間為30-60min。