[發(fā)明專利]長鏈非編碼RNA作為生物標志物在造影劑致急性腎損傷診斷中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010774651.1
• 申請日: 2020-08-04
• 公開（公告）號: CN112226500B
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉勇;劉博文;陳冠仲;陳世群;陳紀言;譚寧
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省人民醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 王蘭蘭

本發(fā)明主要提供lncRNA生物標志物在造影劑致急性腎損傷(CI?AKI)診斷中的運用，通過illumina測序和RT?qPCR篩選出了CI?AKI患者全血中表達差異的兩種長鏈非編碼RNA(long non?coding RNAs,lncRNAs)來作為CI?AKI的診斷生物標志物。所述的lncRNA為lnc?HILPDA和lnc?PRND，在CI?AKI患者全血中表達顯著，預(yù)測效能高，且具有較高的靈敏度和準確度。進一步，本發(fā)明公開了所述的兩種lncRNA標志物可制成CI?AKI診斷試劑盒，為CI?AKI的診斷提供有力的分子生物學(xué)工具，具有深遠的臨床意義和推廣應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及兩種作為長鏈非編碼RNA生物標志物在造 影劑致急性腎損傷中診斷治療的運用，所述兩種lncRNA分別為lnc-HILPDA和 lnc-PRND。

背景技術(shù)

造影劑所致急性腎損傷(contrast-induced acute kidney injury,CI-AKI)是指血管內(nèi)給予碘化造影劑后幾天內(nèi)的腎功能的下降，是心導(dǎo)管插入術(shù)常見的并發(fā) 癥。到目前為止，因造影劑而造成腎臟損害的患者預(yù)計達到數(shù)百萬人，增加了 巨大的疾病負擔(dān)。因此，CI-AKI的早期診斷十分重要。目前研究者廣泛使用血 清肌酐作為急性腎損傷的檢測指標，KDIGO工作組提出了“造影劑所致急性腎損 傷”這一術(shù)語，并建議以使用造影劑后7日內(nèi)出現(xiàn)的血清肌酐1.5倍的增加或者 超出基線水平作為定義的依據(jù)；或以在使用造影劑后48小時內(nèi)血清肌酐水平增 加超出基線值至少0.3mg/dl(26.5μmol/L)為定義的依據(jù)；或以在使用造影劑 后每小時尿量少于0.5ml/kg并持續(xù)6小時以上作為定義的依據(jù)。此定義里的血清肌酐的特異性較差，因為血清肌酐受體液轉(zhuǎn)移和藥物效應(yīng)的影響而產(chǎn)生波動。 另外血清肌酐的不敏感性和遲發(fā)性以及準確的新型生物標志物的缺失也給 CI-AKI的早期檢測帶來了很大的挑戰(zhàn)。此外，由于CI-AKI的關(guān)鍵分子機制和 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)仍不清楚，應(yīng)用生理鹽水水化等經(jīng)典預(yù)防策略的有效性存在爭議和局 限性，缺乏特定的靶向藥物。因此，篩選潛在的生物標志物并揭示關(guān)鍵的分子 發(fā)病機制可能是CI-AKI的基石。

長鏈非編碼RNA(Long non-coding RNAs，lncRNAs)是一種含有200多個 核苷酸，主要存在于真核生物中，不編碼蛋白質(zhì)的RNA。它具有廣泛的生物學(xué) 過程，參與調(diào)控機體生長、發(fā)育和疾病發(fā)生等許多生命活動。由于其高度的特 異性、體液的穩(wěn)定性和可檢測性，lncRNAs可以作為預(yù)測各種疾病的新型生物 標志物。目前在CI-AKI領(lǐng)域中，lncRNAs作為新型生物標志物的研究為數(shù)不多， 亟需進一步地去研究和探討。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足之處而提供長鏈非編碼RNA作 為生物標志物在制備診斷造影劑致急性腎損傷試劑中的應(yīng)用以及包含能檢測本 發(fā)明所述長鏈非編碼RNA的檢測引物。

一方面本發(fā)明提供了長鏈非編碼RNA作為生物標志物在制備診斷造影劑致 急性腎損傷試劑中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述長鏈非編碼RNA包括lnc-HILPDA或/和lnc-PRND。

另一方面發(fā)明提供了一種檢測造影劑致急性腎損傷的產(chǎn)品，所述產(chǎn)品包括 用于檢測長鏈非編碼RNA lnc-HILPDA或/和lnc-PRND的引物。

優(yōu)選地，所述產(chǎn)品為診斷試劑或試劑盒。

優(yōu)選地，所述診斷試劑或試劑盒包括對lnc-HILPDA或/和lnc-PRND具有檢 測特異性的探針、基因芯片或PCR引物。

優(yōu)選地，所述引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示，其中用于檢測 lnc-HILPDA的引物為如SEQ ID NO：1～2所示的核苷酸序列，用于檢測lnc-PRND 的引物為如SEQID NO：3～4所示的核苷酸序列。

優(yōu)選地，所述試劑盒還包括內(nèi)參基團、cDNA模板、Taqman DNA聚合酶、 陽性對照液、陰性對照液、熒光染料、dNTP。