[發(fā)明專利]一種利用單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)輔助分選脂質(zhì)體的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010773498.0
• 申請日: 2020-08-04
• 公開（公告）號: CN111870581B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 顧宏周;陳黎曼
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/26;A61K47/28;A61K47/22;A61P35/00
• 代理公司: 上海容慧專利代理事務(wù)所(普通合伙) 31287
• 代理人: 于曉菁

1.一種利用單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)輔助分選脂質(zhì)體的方法，其特征在于，所述方法由以下步驟組成：

步驟1：制備單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)，所述單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)的序列選自SEQ ID NO.1-4中任一，且所述單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)經(jīng)過膽固醇或生育酚修飾；

步驟2：將所述步驟1制備的單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)與待分選的脂質(zhì)體混合、孵育，得到單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)包裹的脂質(zhì)體復(fù)合體溶液，其中，所述單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)與待分選的脂質(zhì)體的混合體積比例為1:350-1:390，孵育1-3h；

步驟3：將所述步驟2中得到的脂質(zhì)體復(fù)合體溶液等密度梯度離心，得分層液；

步驟4：分別自上而下收集分層液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟1中單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)為長單鏈DNA經(jīng)過輔助噬菌體法制得。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述長單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)的基因序列的5'和3'端分別添加依賴Zn²⁺的I類DNA切割脫氧核酶識別序列。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟1中單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)包括三角形、四邊形、菱形或方結(jié)形。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟2中單鏈DNA納米結(jié)構(gòu)與待分選的脂質(zhì)體的混合體積比例為1:375。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟2中的孵育條件為40℃下孵育2h。