[發(fā)明專利]一種納米塑料毒性的檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010771253.4 | 申請日： | 2020-08-04 |
| 公開（公告）號： | CN111850083B | 公開（公告）日： | 2022-07-15 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 童中華;馬喜文 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國科學(xué)技術(shù)大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/02 | 分類號： | C12Q1/02;G01N33/68;G01N30/02;G01N27/62;G01N21/64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 納米 塑料 毒性 檢測 方法 | ||
本發(fā)明提供了一種納米塑料毒性的檢測方法，包括：銅綠微囊藻經(jīng)培養(yǎng)基預(yù)先培養(yǎng)后，暴露于待測納米塑料中，根據(jù)銅綠微囊藻的生長抑制率、葉綠素a含量、藻青蛋白熒光強度、胞內(nèi)微囊藻毒素、胞外微囊藻毒素和/或銅綠微囊藻的代謝產(chǎn)物來判斷納米塑料的濃度；對照組包括水、培養(yǎng)基和銅綠微囊藻；受試組包括培養(yǎng)基、銅綠微囊藻和待測納米塑料。本發(fā)明以銅綠微囊藻的生長抑制率，葉綠素a含量，藻青蛋白熒光強度，微囊藻毒素的產(chǎn)生與釋放和/或銅綠微囊藻的代謝產(chǎn)物變化來評價納米塑料對銅綠微囊藻的生長和/或代謝產(chǎn)物的毒性影響。通過檢測生理生化指標即可初步判斷待測樣品是否受到納米塑料的污染，為納米塑料的毒理學(xué)檢測提供新方法。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及毒性檢測方法技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種納米塑料毒性的檢測方法。
背景技術(shù)
由于塑料的廣泛使用，沿海地區(qū)和海洋中發(fā)生了大量的富集，引起了人們對水生生物危害的日益關(guān)注。由于某些消費品的添加劑和塑料的降解會形成≤5mm的微塑料，一旦釋放到水體中，將引起水污染。在環(huán)境中，微塑料可能降解為納米塑料。因此，近年來，納米塑料在環(huán)境中的存在，命運和污染也受到了廣泛關(guān)注。納米聚苯乙烯是一種常用的納米塑料顆粒，具有廣泛的應(yīng)用，包括生物傳感器，個人護理產(chǎn)品，藥物遞送和生物成像。目前，已有研究表明納米聚苯乙烯對線蟲具有腸毒性、神經(jīng)毒性和生殖毒性；也會影響魚類的行為，后代以及組織損傷。因此，對于納米塑料的毒性檢測尤為重要。
銅綠微囊藻作為水華的主要貢獻者，其生長受到氮含量、磷含量、氮磷比、光照和微量元素等因素影響。其在富營養(yǎng)化水體中具有頑強的生命力。同時，其可以產(chǎn)生與釋放微囊藻毒素，微囊藻毒素作為一種肝毒素，嚴重威脅水生浮游植物，水生浮游動物以及水生生物的安全，甚至威脅人類飲用水的安全問題。但是有研究表明銅綠微囊藻對環(huán)境危害十分敏感。因此，其具有潛力作為一種檢測水體污染的水生浮游植物。
代謝組學(xué)分析作為一種跨學(xué)科技術(shù)正在引起人們的廣泛關(guān)注。代謝組學(xué)主要是細胞，組織或生物流體中低分子量有機代謝物的研究。在外部刺激下，生物系統(tǒng)的內(nèi)源性代謝物可能比其他生物功能更早地發(fā)生變化，因此通過代謝變化可以提供更全面，更敏感的毒性評估。據(jù)我們所知，目前有研究納米金屬材料及納米碳材料對水生生物代謝的影響，但納米塑料對水生浮游植物代謝產(chǎn)物的影響尚未得到很好的闡明和理解。因此，如何通過代謝組學(xué)策略對納米塑料的毒性進行評估，探索出響應(yīng)納米塑料毒性的生物標志物，是非常必要的。
發(fā)明內(nèi)容
有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種納米塑料毒性的檢測方法，本發(fā)明提供的方法快捷高效，易于操作。
本發(fā)明提供了一種納米塑料毒性的檢測方法，包括：
銅綠微囊藻經(jīng)培養(yǎng)基預(yù)先培養(yǎng)后，暴露于待測納米塑料中，根據(jù)銅綠微囊藻的生長抑制率、葉綠素a含量、藻青蛋白熒光強度、胞內(nèi)微囊藻毒素、胞外微囊藻毒素和/或銅綠微囊藻的代謝產(chǎn)物來判斷納米塑料的濃度；
對照組包括水、培養(yǎng)基和銅綠微囊藻；
受試組包括培養(yǎng)基、銅綠微囊藻和待測納米塑料。
優(yōu)選的，所述銅綠微囊藻為FACHB315，本發(fā)明所述暴露時間為94～98h；更優(yōu)選為95～97h；最優(yōu)選為96h；采用銅綠微囊藻FACHB315對數(shù)生長期進行檢測；
所述納米塑料為納米聚苯乙烯；所述納米聚苯乙烯的濃度為0mg/L～100mg/L。
優(yōu)選的，所述銅綠微囊藻預(yù)先培養(yǎng)具體為：將銅綠微囊藻培養(yǎng)在培養(yǎng)基中，溫度24～26℃；光暗比循環(huán)12h/12h，光照強度為2000lux；所述培養(yǎng)基中氮含量為0.5mg/L。
優(yōu)選的，所述
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