[發(fā)明專利]上皮細(xì)胞培養(yǎng)液

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010769468.2
• 申請日: 2020-08-03
• 公開（公告）號: CN111849868B
• 公開（公告）日: 2022-02-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 田文儒;王若冰;王一鳴
• 申請（專利權(quán)）人: 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 北京化育知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11833
• 代理人: 尹均利

本發(fā)明公開了一種上皮細(xì)胞培養(yǎng)液，它包括下列組分：DMEM 13.4g/L、胎牛血清5％、黃芩苷10～30mg/L、白藜蘆醇1～4.5mg/L、谷胱甘肽300～500mg/L、青霉素60mg/mL和鏈霉素100mg/L。本發(fā)明使細(xì)胞在培養(yǎng)過程中降低外界刺激，并增加細(xì)胞的增殖速度，更快的獲得滿足需要數(shù)量的細(xì)胞。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種上皮細(xì)胞培養(yǎng)液。

背景技術(shù)

細(xì)胞培養(yǎng)是指人工體外模擬體內(nèi)環(huán)境，使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)液是為細(xì)胞提供營養(yǎng)和保證細(xì)胞正常生長的物質(zhì)基礎(chǔ)。細(xì)胞的體外培養(yǎng)在生物技術(shù)以及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，對于人類與動物的疾病研究、藥物的開發(fā)甚至新型食品的開發(fā)具有重要意義。

目前常用的細(xì)胞培養(yǎng)液僅僅在DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)液的基礎(chǔ)上加入胎牛血清和抗生素，某些細(xì)胞系繁殖能力較差，對環(huán)境變化的抗性差，易發(fā)生凋亡甚至壞死。導(dǎo)致實驗周期長，實驗效率低，為基于細(xì)胞體外培養(yǎng)的研究帶來了不便。所以尋找適用于這類細(xì)胞的合適的培養(yǎng)體系，成為深入研究和應(yīng)用這類細(xì)胞的必要前提。

發(fā)明內(nèi)容

為克服上述問題，本發(fā)明提供了一種使細(xì)胞在培養(yǎng)過程中降低外界刺激，并增加細(xì)胞的增殖速度，更快的獲得滿足需要數(shù)量細(xì)胞的上皮細(xì)胞培養(yǎng)液。

本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：一種上皮細(xì)胞培養(yǎng)液，它包括下列組分：DMEM 13.4g/L、胎牛血清5％、黃芩苷10～30mg/L、白藜蘆醇1～4.5mg/L、谷胱甘肽300～500mg/L、青霉素60mg/mL和鏈霉素100mg/L。

進(jìn)一步的，該上皮細(xì)胞培養(yǎng)液還包括pH調(diào)節(jié)劑，該上皮細(xì)胞培養(yǎng)液的pH為6.8～7.2。

優(yōu)選的，所述pH調(diào)節(jié)劑為0.1mol/L的碳酸氫鈉溶液

優(yōu)選的，所述黃芩苷為10mg/L；所述白藜蘆醇為1mg/L；所述谷胱甘肽為300mg/L。

本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)液成分明確，配方簡單，配置材料便宜易得，細(xì)胞貼壁迅速，活力好，生存率高，繁殖迅速。可應(yīng)用于實驗室，獲得高質(zhì)量細(xì)胞，為實驗研究提供必要的材料支撐。

白藜蘆醇是一種非黃酮類多酚化合物，是植物體在受到外界侵害時分泌的一種抗毒素，有抗氧化、抗炎、促增殖的作用。黃芩苷是從黃芩中提取的一種黃酮類化合物，具有抑菌、抗炎、抗氧化的作用。谷胱甘肽是一種含γ-酰胺鍵和巰基的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸組成，具有抗氧化和整合解毒的作用。本發(fā)明在傳統(tǒng)DMEM的基礎(chǔ)上添加以上三種添加劑，使細(xì)胞在培養(yǎng)過程中降低外界刺激，并增加細(xì)胞的增殖速度，更快的獲得滿足需要數(shù)量的細(xì)胞。

附圖說明

附圖1為本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)和普通DMEM培養(yǎng)液的細(xì)胞增值率圖；

具體實施方式

為了更好地理解本發(fā)明，下面結(jié)合附圖1來詳細(xì)解釋本發(fā)明的實施方式。

一種上皮細(xì)胞培養(yǎng)液，各組分的濃度配比如下：

稱取DMEM 13.4g、黃芩苷10～30mg、白藜蘆醇1～4.5mg、谷胱甘肽300～500mg、青霉素60mg和鏈霉素100mg，置于適當(dāng)容器中，加入950mL超純水?dāng)嚢枞芙?0～15分鐘，使用0.1mol/L的碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH為6.8～7.2，加入50mL胎牛血清，使得胎牛血清占總體積的5％，最后用0.45微米的微孔濾膜抽濾，收集濾液，即可保存使用。

具體實施例1

一種細(xì)胞培養(yǎng)液，各組分的濃度配比如下：