[發(fā)明專利]一種三維多孔微載體支架及其采用離子型添加劑制備的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010766076.0
• 申請日: 2020-08-03
• 公開（公告）號: CN111921012A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉偉;鄢曉君
• 申請（專利權(quán)）人: 北京華龕生物科技有限公司
• 主分類號: A61L27/20
• 分類號: A61L27/20;A61L27/22;A61L27/24;A61L27/56
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

1.一種采用離子型添加劑制備三維多孔微載體支架的方法，包括如下步驟：

1)將生物材料與緩沖液混合后，加入離子型致孔添加劑混合，得到完全共溶的預(yù)混液；

其中，所述生物材料包括人工合成的生物材料和/或天然生物材料；

2)有機(jī)溶劑與非離子型表面活性劑混合，得到所述有機(jī)相溶液，并預(yù)冷；

3)乳液的配置：在制冷條件下將預(yù)混液與固化劑混合，得到水相溶液；將所述水相溶液加入所述有機(jī)相溶液中進(jìn)行乳化，得到W/O型的乳液液滴，然后將其進(jìn)行低溫避光乳化反應(yīng)，得到乳液；

4)將所述乳液依次除去液體成分、選用濾網(wǎng)將有機(jī)相濾除，并篩選出所需粒徑范圍內(nèi)粒徑的液體微球；

5)將所述液體微球用水潤濕，然后進(jìn)行冷凍，經(jīng)所述冷凍后進(jìn)行干燥，得到三維多孔微載體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述人工合成的生物材料選自聚乙二醇、聚乙二醇衍生物、聚乙二醇二丙烯酸酯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚丙烯酰胺、聚乳酸、聚羥基酸、聚乳酸醇酸共聚物、聚二甲基硅氧烷、聚酸酐、聚酸酯、聚酰胺、聚賴氨酸、聚縮醛、聚氰基丙烯酸酯、聚氨基甲酸酯、聚吡咯、聚甲基丙烯酸酯、聚乙烯、聚碳酸酯和聚氧化乙烯中的至少一種；

所述緩沖液可選自去離子水、Tris緩沖液、醋酸緩沖液、磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、檸檬酸鹽緩沖液和碳酸鹽緩沖液中的至少一種；

所述天然生物材料選自膠原、蛋白多糖、糖蛋白、明膠、明膠衍生物、甲殼素、藻酸鹽、藻酸鹽衍生物、瓊脂、纖維蛋白原、基質(zhì)膠、透明質(zhì)酸、層連接蛋白和纖維連接蛋白中的至少一種；和/或

所述離子型致孔添加劑選自氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、氯化鋇、硫酸鈉、硫酸氫鈉、硫酸鉀、硫酸氫鉀、磷酸鈉、磷酸一氫鈉、磷酸二氫鈉、磷酸鉀、磷酸一氫鉀、磷酸二氫鉀、硝酸鈉和硝酸鉀中的至少一種。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于：在混合之前，所述緩沖液濃度范圍0.005～1M；

所述預(yù)混液中，以總量為100％計(jì)，單位為g/mL，所述生物材料的質(zhì)量體積濃度為0.1％～30％，所述離子型致孔添加劑的質(zhì)量體積濃度為0.1％～30％，余量為所述緩沖液；

步驟1)中混合的攪拌速率為50rmp～300rmp。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：步驟5)中，所述冷凍的溫度為0～-196℃；

所述干燥采用冷凍干燥的方法，所述冷凍干燥的溫度為0～-50℃，時(shí)間為10～96h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：所述有機(jī)溶劑與所述非離子型表面活性劑的體積比為5～100:1；

步驟2)中，所述混合的攪拌速率為100～3000rpm，攪拌時(shí)間為10～120min；

所述預(yù)冷的溫度為0～-80℃，時(shí)間為2～24h；

步驟2)中還包括所述有機(jī)溶液混合之前進(jìn)行預(yù)冷步驟2)中所采用的配置裝置。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于：步驟3)中，所述制冷條件的溫度為0～-196℃；采用低溫制冷機(jī)實(shí)現(xiàn)，所述低溫制冷機(jī)選用的制冷劑為液氮、乙醇、三氯乙烷、異丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙二醇、丙二醇、異丁烷、正己烷、氯仿、四氫呋喃、溴己烷和乙腈中的至少一種；

所述預(yù)混液與所述固化劑的體積比為200～10000:1；

所述水相溶液與所述有機(jī)相溶液的體積比為1:5～40；

步驟3)中，所述乳化的攪拌速率為30～1000rpm，溫度為0℃～80℃，時(shí)間為10～60min；

所述低溫避光乳化反應(yīng)的轉(zhuǎn)速為10～2000rmp，溫度為-80℃～0℃，反應(yīng)時(shí)間為2～48h。