[發明專利]一種精制牦牛骨膠原蛋白肽的制備方法

在審

• 申請號: 202010765751.8
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN111893156A
• 公開（公告）日: 2020-11-06
• 發明（設計）人: 雷紹南;黃彪;馬青林
• 申請（專利權）人: 青海瑞肽生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/14
• 代理公司: 長沙新裕知識產權代理有限公司 43210
• 代理人: 吳越

本發明公開了一種精制牦牛骨膠原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步驟：(1)預處理；(2)粉碎研磨；(3)加熱提取；(4)酶解；(5)離心過濾；(6)大孔吸附樹脂純化：將牦牛骨膠原蛋白肽濾液按適當的流速通過預先填裝好的大孔吸附樹脂層析柱，待上樣完成后，先采用清水洗脫1～4個柱體積進行除雜，再采用55％～80％的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，即得牦牛骨膠原蛋白肽純化液；(7)減壓濃縮；(8)干燥滅菌。本發明利用大孔吸附樹脂分離技術對牦牛骨膠原蛋白肽進行純化，兼具了富集小分子肽、脫色、脫鹽和除異味的作用，是一種可顯著提高牦牛骨膠原蛋白肽品質的生產方法。

技術領域

本發明屬于膠原蛋白提取技術領域，具體涉及一種精制牦牛骨膠原蛋白肽的制備方法。

背景技術

隨著人們生活水平的不斷提高，國內外對牛羊肉的需求量不斷增大，同時在國家政府的扶持下，國內牛羊的養殖規模正在迅速擴大，然而牛羊骨的低利用率導致了資源的嚴重浪費。牦牛是中國乃至世界都稀有的半野生地方類特有種群，主要生長在碧水藍天和牧草茂盛的青藏高原、青海等地區，這些地區高寒缺氧且冰封期長達半年左右，且牦牛在夏天啃食的牧草中還夾雜著各類名貴中草藥，這樣環境下的牦牛不僅肉質鮮美而且渾身是寶，其中牦牛骨就是世上絕無僅有的優質膠原提取寶庫。

然而，當今國內市場上牛骨膠原蛋白肽與國外進口骨膠原蛋白肽之間的品質差距主要在于：1)國內牛骨膠原蛋白肽中的小分子肽集中度不夠；2)國內牛骨膠原蛋白肽產品色澤泛黃；3)國內牛骨膠原蛋白肽產品的異味未能完全有效去除。造成這些問題的主要技術原因是分離純化工藝過于繁瑣或者過于簡陋，傳統工藝主要包括簡單過濾、膜過濾、離子交換、活性炭吸附等方法，在實際生產中，采用過于簡單的分離純化工藝會導致產品出現上述問題，采用過于繁復的分離純化工藝會導致生產成本過高且得率嚴重下降。因此，為解決上述問題，開發一種高效的牦牛骨膠原蛋白肽精制純化工藝是十分必要的。

發明內容

針對上述問題，本發明提供了一種精制牦牛骨膠原蛋白肽的方法，本發明利用大孔吸附樹脂分離技術對牦牛骨膠原蛋白肽進行純化，兼具了富集小分子肽、脫色、脫鹽和除異味的作用，是一種可顯著提高牦牛骨膠原蛋白肽品質的生產方法。

本發明通過下述技術方案實現。

一種精制牦牛骨膠原蛋白肽的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)預處理：剔除新鮮牦牛骨表面的脂肪、殘肉等，之后清洗干凈，切成塊狀，然后脫脂、去除雜蛋白，最后用清水洗滌至pH為中性；

(2)粉碎研磨：將步驟(1)得到的牦牛骨粉碎，之后再加入少量水研磨成泥漿狀，得牦牛骨泥漿；

(3)加熱提取：于牦牛骨泥漿中加入水進行加熱提取，得牦牛骨膠原蛋白提取液；

(4)酶解：調節牦牛骨膠原蛋白提取液的pH至合適范圍后，加入酶進行酶解，得牦牛骨膠原蛋白肽粗提液；

(5)離心過濾：將牦牛骨膠原蛋白肽粗提液進行離心過濾，收集濾液得牦牛骨膠原蛋白肽濾液；

(6)大孔吸附樹脂純化：將牦牛骨膠原蛋白肽濾液按適當的流速通過預先填裝好的大孔吸附樹脂層析柱，待上樣完成后，先采用清水洗脫1～4個柱體積進行除雜，再采用55％～80％的乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，即得牦牛骨膠原蛋白肽純化液；

(7)減壓濃縮：將牦牛骨膠原蛋白肽純化液進行減壓濃縮，濃縮至溶液無醇味，回收乙醇，即得牦牛骨膠原蛋白濃縮液；

(8)干燥滅菌：將牦牛骨膠原蛋白濃縮液進行冷凍干燥或噴霧干燥，滅菌，得牦牛骨膠原蛋白肽。

作為具體技術方案，所述步驟(3)加熱提取的條件為：料液比為1:5～1:10kg/L、提取溫度為75～90℃，提取時間為4～10h。

作為具體技術方案，所述步驟(4)酶解步驟中采用的酶為堿性蛋白酶。