[發明專利]一種快速高效獲得藜麥組培苗的方法

在審

• 申請號: 202010762843.0
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN111670810A
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發明（設計）人: 孫雁霞;李志芳;王天;鄔曉勇
• 申請（專利權）人: 成都大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李蕊

本發明提供了一種快速高效獲取藜麥組培苗的方法，包括以下步驟：制備藜麥外植體；將外植體進行無菌處理后培養無菌苗；將無菌苗剪成小段進行創傷組織誘導培養得愈傷組織；將愈傷組織切成小塊后進行增殖培養；然后將愈傷組織切成小塊后進行分化培養得叢生芽；將叢生芽上的不定芽剪下，進行壯苗培養得無根苗，將無根苗進行生根培養得組培苗；將培養瓶移至室外煉苗后開蓋煉苗，取出組培苗移入營養盤培養，待長出新葉和新芽后，揭膜煉苗，40?50天后，制得。該方法旨在提供一種能夠加速獲得藜麥組培苗的培養技術及工藝流程，為藜麥再生體系構建，以及通過轉基因、體細胞雜交等手段獲得藜麥新品種奠定生物學基礎。

技術領域

本發明屬于藜麥組培苗制備技術領域，具體涉及一種快速高效獲得藜麥組培苗的方法。

背景技術

藜麥(Chenopodium quinoa Willd)別稱南美藜、藜辜等，是一年生黎科草本植物，起源于南美洲安第斯山脈，已有5000多年的種植歷史，由于其豐富的營養價值和獨特的功能特性，被印第安人稱為“糧食之母”。藜麥含有大量的優質蛋白質，并且其氨基酸組成均衡，聯合國糧農組織(FAO)已正式推薦其為最適宜人類的完美“全營養食品”，稱其為可滿足人類基本食物需求的唯一單體植物。

在目前進行藜麥的相關研究中，由于藜麥幼苗弱小，對營養和水分的需求旺盛，因此，導致再生體系構建較難，藜麥組培苗的缺乏而無法進行相關基因功能的研究，因此只能利用擬南芥、煙草或藜麥的毛狀根來進行，而此類方法無法真正的來驗證相關基因在藜麥植株中的調控作用。

目前，已有部分文獻表明藜麥組培可以作為繁殖育苗的最佳方法，但是現有的藜麥組培方法獲得的組培苗的成活率較低，還無法滿足使用需求。

發明內容

針對現有技術中存在的上述問題，本發明提供一種快速高效獲得藜麥組培苗的方法，該方法可有效解決現有的方法存在的成活率低的問題，旨在提供一種能夠加速獲得藜麥組培苗的培養技術及工藝流程，為藜麥的規模化繁育以及藜麥的遺傳轉化提供一種新的技術平臺和技術支持，為藜麥再生體系構建，以及通過轉基因、體細胞雜交等手段獲得藜麥新品種奠定生物學基礎。

為實現上述目的，本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：

一種快速高效獲取藜麥組培苗的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備藜麥外植體；

(2)將步驟(1)中的外植體進行無菌處理，然后培養成無菌苗；

(3)將步驟(2)中的無菌苗剪成小段或小塊，放置于誘導培養基中進行創傷組織誘導培養，培養過程中先進行暗培養，再進行光照培養，獲得愈傷組織；

(4)將步驟(3)中獲得的愈傷組織切成小塊后放置于增殖培養基中進行增殖培養；

(5)將步驟(4)中經過增殖培養的愈傷組織切成小塊后放置于分化培養基中進行分化培養，獲得叢生芽；

(6)將步驟(5)中叢生芽上的不定芽剪下，將剪下的不定芽放在壯苗培養基中進行壯苗培養，得到無根苗，將所得無根苗轉移至生根培養基中進行生根培養，獲得組培苗；

(7)將步驟(6)中裝有組培苗的培養瓶轉移至室外煉苗，然后開蓋煉苗，再取出組培苗，洗凈培養基，將其移入營養盤中，澆透水覆膜培養，待長出新葉和新芽后，揭膜煉苗，40-50天后，獲得出圃苗。

進一步地，步驟(1)中外植體的制備過程為：將顆粒飽滿的種子在37-39℃恒溫水浴鍋中浸泡25-35min，冷卻至室溫，制得。

進一步地，步驟(1)中外植體的制備過程為：將顆粒飽滿的種子在38℃恒溫水浴鍋中浸泡熱30min，冷卻至室溫，制得。

上述操作可對種子進行有效的除菌和催芽，提高發芽效果。