[發明專利]一種杉木內生真菌發酵濾液及其萃取物、制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010761511.0
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN111808888B
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 黃麟;卞金月;方玉蘭;宋青;孫美玲;巨云為
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;A01N63/30;A01P3/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 南京燦爛知識產權代理有限公司 32356
• 代理人: 李志鴻

1.一種杉木內生真菌發酵濾液，其特征在于，其由杉木內生真菌經過發酵和過濾形成：將杉木內生真菌的菌絲塊接種至培養基中震蕩培養，28℃條件下，150rpm震蕩培養5d，采用漏斗過濾收集發酵濾液；通過過濾得到無菌發酵濾液；所述的杉木內生真菌保藏于中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏地址為中國.武漢.武漢大學，其分類命名為Epicoccum dendrobii SMEL，其保藏編號是CCTCC No: M 2019895，保藏日期：2019年11月4日。

2.權利要求1所述的杉木內生真菌發酵濾液的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

將杉木內生真菌的菌絲塊接種至培養基中震蕩培養，28℃條件下，150rpm震蕩培養5d，采用漏斗過濾收集發酵濾液；通過過濾得到無菌發酵濾液。

3.權利要求1所述的杉木內生真菌發酵濾液的乙酸乙酯萃取物，其特征在于，由杉木內生真菌經過發酵、過濾得到無菌發酵濾液，通過乙酸乙酯對無菌發酵濾液進行萃取以得到杉木內生真菌發酵濾液的乙酸乙酯萃取物：將杉木內生真菌的菌絲塊接種至培養基中，置于暗室搖床25℃，130rpm搖培40d，采用漏斗過濾收集發酵濾液，并過濾得到無菌發酵濾液；向無菌發酵濾液加入3倍體積的乙酸乙酯并充分混合，然后靜置24h；采用分液漏斗收集上層有機相，采用旋轉蒸發儀在40℃條件下對該有機相進行蒸餾，沉淀采用DMSO進行溶解，通過0.45μm濾器過濾，得到發酵濾液的乙酸乙酯萃取物。

4.權利要求3所述的杉木內生真菌發酵濾液的乙酸乙酯萃取物的制備方法，其特征在于，將杉木內生真菌的菌絲塊接種至培養基中，置于暗室搖床25℃，130rpm搖培40d，采用漏斗過濾收集發酵濾液，并過濾得到無菌發酵濾液；向無菌發酵濾液加入3倍體積的乙酸乙酯并充分混合，然后靜置24h；采用分液漏斗收集上層有機相，采用旋轉蒸發儀在40℃條件下對該有機相進行蒸餾，沉淀采用DMSO進行溶解，通過0.45μm濾器過濾，得到發酵濾液的乙酸乙酯萃取物。

5.權利要求1所述的杉木內生真菌發酵濾液在制備抑制杉木炭疽菌孢子萌發和附著胞發育的農用藥物中的應用。

6.權利要求1所述的杉木內生真菌發酵濾液的乙酸乙酯萃取物在制備抑制杉木炭疽菌生長的農用藥物中的應用。

7.權利要求1所述的杉木內生真菌發酵濾液的乙酸乙酯萃取物在制備抑制杉木炭疽菌孢子萌發和附著胞發育的農用藥物中的應用。

8.權利要求1所述的杉木內生真菌發酵濾液的乙酸乙酯萃取物在制備防治杉木炭疽病的農用藥物中的應用。