[發明專利]定向誘導hiPSC分化為神經細胞體系中培養神經元細胞的基礎培養基有效
| 申請號： | 202010750543.0 | 申請日： | 2017-07-28 |
| 公開（公告）號： | CN111793607B | 公開（公告）日： | 2022-05-17 |
| 發明（設計）人： | 楊濤;隋昳 | 申請（專利權）人： | 楊濤 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京鵬帆慧博知識產權代理有限公司 11903 | 代理人： | 袁冰 |
| 地址： | 200020 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 定向 誘導 hipsc 化為 神經細胞 體系 培養 神經元 細胞 基礎 培養基 | ||
【權利要求書】：
1.一種定向誘導hiPSC分化為神經細胞體系的組合培養基，其特征在于，所述組合培養基為基礎培養基、HS5條件培養基和誘導培養基；
所述的基礎培養基為添加有20ng/mlbFGF、20ng/ml EGF、2％B27添加劑、1％N2添加劑、1％胎牛血清、10μM佛司可林和0.2mM抗壞血酸的neurobasal培養基，所述百分比為體積百分比；
所述HS5條件培養基為含有骨髓基質細胞HS5的分泌液的誘導培養基；所述HS5為經過照射的HS5；所述照射的條件為：γ射線輻照強度75-85Gy，照射時間為28-35分鐘；
所述誘導培養基為包括下述組分：20％KSR、1％NEAA、1mM的谷氨酰胺、0.1mMβ-巰基乙醇、10ng/ml bFGF、10ng/ml EGF、10ng/ml BDNF、10ng/ml NT-3、2％B27、0.5mM雙丁酰環磷酸腺苷、1ng/ml轉化生長因子β3和500ng/ml頭蛋白的DMEM/F12培養基，所述百分比為體積百分比；
所述神經細胞體系中含有神經系統細胞包括神經干細胞、功能性神經元、星形膠質細胞和少突膠質細胞；
所述功能性神經元包括多巴胺能神經元、乙酰膽堿能神經元、γ-氨基丁酸能神經元、5-羥色胺能神經元和幼稚神經元。
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