[發(fā)明專利]促進(jìn)蛋白胞外表達(dá)的信號(hào)肽有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202010749128.3 | 申請(qǐng)日： | 2020-07-30 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111850008B | 公開（公告）日： | 2023-10-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 佟毅;李義;陶進(jìn);劉松;徐奎棟;李江華;陳堅(jiān) | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 吉林中糧生化有限公司;江南大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12N15/31 | 分類號(hào)： | C12N15/31;C12N15/75;C12N15/62;C12N1/21;C12N9/44;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽(yáng)光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211 | 代理人： | 仇鈺瑩 |
| 地址： | 130000 吉林省長(zhǎng)*** | 國(guó)省代碼： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 促進(jìn) 蛋白 外表 信號(hào)肽 | ||
1.信號(hào)肽，其特征在于，核苷酸序列如SEQ ID NO.1～3所示任一。
2.一種提高枯草芽孢桿菌胞外蛋白表達(dá)量的方法，其特征在于，在編碼蛋白的核苷酸序列的N端添加SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示信號(hào)肽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，在目的蛋白的N端添加所述信號(hào)肽，并構(gòu)建重組質(zhì)粒，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入枯草芽孢桿菌。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述目的蛋白為任意枯草芽孢桿菌分泌至胞外的蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，所述目的蛋白包括普魯蘭酶和sfGFP；所述普魯蘭酶的NCBI登錄號(hào)為AMQ67157。
6.一種重組質(zhì)粒，其特征在于，連接有權(quán)利要求1所述的信號(hào)肽。
7.一種重組菌，其特征在于，在菌體細(xì)胞中含有權(quán)利要求6所述的重組質(zhì)粒。
8.一種提高普魯蘭酶表達(dá)量的方法，其特征在于，將權(quán)利要求1所述信號(hào)肽添加至普魯蘭酶的N端。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，將權(quán)利要求1所述信號(hào)肽添加至普魯蘭酶的N端構(gòu)建得到重組質(zhì)粒，接著將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入宿主中得到重組菌，再將重組菌在培養(yǎng)體系中發(fā)酵生產(chǎn)普魯蘭酶。
10.權(quán)利要求1所述信號(hào)肽，或權(quán)利要求2～5或權(quán)利要求8或9任一所述方法，或權(quán)利要求6所述重組質(zhì)粒，或權(quán)利要求7所述重組菌在提高胞外蛋白表達(dá)量中的應(yīng)用。
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