[發明專利]一種基于夾板水培法的玉米根系突變體篩選方法

有效

• 申請號: 202010748779.0
• 申請日: 2020-07-30
• 公開（公告）號: CN111837919B
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 李曉玉;徐云劍;吳符浪;鄒睿凡;翁斌;張雪紅
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: A01G31/00
• 分類號: A01G31/00;A01G31/02;A01H1/04
• 代理公司: 西安匯恩知識產權代理事務所(普通合伙) 61244
• 代理人: 張偉花

1.一種基于夾板水培法的玉米根系突變體篩選方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1、玉米種子消毒，將玉米種子置于50 mL的圓底無菌離心管中，在室溫下先用ddH₂O洗滌2次，去除玉米種子表面雜質；然后用70%的乙醇溶液表面消毒5 min，然后將乙醇溶液瀝出，用ddH₂O將種子洗三次；洗凈后，用12%的花王消毒溶液消毒15 min，再將花王消毒溶液瀝出，然后用ddH₂O將種子洗三次；將玉米種子放在濾紙上靜置，靜置至玉米種子表面變干；

S2、在夾板培養裝置中培養，所述夾板培養裝置包括內玻璃板（2）、發芽紙（3）、外玻璃板（4）和固定夾（1），所述發芽紙（3）設置有兩層，且其分別設置在內玻璃板（2）和外玻璃板（4）的相鄰側，所述固定夾（1）設置有四個，所述內玻璃板（2）與外玻璃板（4）之間通過四個固定夾（1）固定，玉米種子設置在兩層發芽紙（3）之間，所述固定夾（1）與內玻璃板（2）和外玻璃板（4）接觸處設置有海綿墊（6），夾板培養裝置用配制好的2.5 g/L克菌丹溶液進行浸潤處理，然后夾板間隙中放置8個大小相同的消毒后的玉米種子，玉米種子水平距離為3cm，依次做好標記，且每個夾板培養裝置中含有至少一個野生型玉米，然后以30個夾板培養裝置為一組，放置在培養盆中進行培養，且在培養盆加入霍格蘭培養液，霍格蘭培養液將夾板培養裝置浸沒，霍格蘭培養液將夾板培養裝置浸沒具體是夾板培養裝置的內玻璃板（2）和外玻璃板（4）在培養盆中豎向放置，培養盆中的霍格蘭培養液浸沒發芽紙（3）下部至少2cm處，置于光照培養室內培養；

S3、玉米根系性狀記錄，玉米種子在培養盆中培養14天，在玉米種子培養14天后記錄各組玉米種子發芽成的玉米幼苗的根系結構，利用Epson Perfection V700 Photo系統對玉米幼苗的根系結構進行掃描，使用WinRhizo根系分析系統對掃描圖像進行根特征分析；

S4、篩選移栽，將掃描分析后經過篩選的玉米突變體移栽至無紡布培養袋中，培養袋中放置有培養基質，移栽后向玉米突變體根部施加生根溶液以促進玉米生根，室內培養7天后，移栽大田，完成玉米突變體篩選過程。

2.根據權利要求1所述的一種基于夾板水培法的玉米根系突變體篩選方法，其特征在于，所述霍格蘭培養液根據Hoagland and Arnon 1950配方配置。

3.根據權利要求1所述的一種基于夾板水培法的玉米根系突變體篩選方法，其特征在于，在S2中夾板培養裝置浸潤處理具體為將裁剪好的發芽紙（3）浸泡于配制好的2.5 g/L克菌丹溶液中使其完全濕潤，然后撈出，擠壓掉多余的克菌丹溶液。

4.根據權利要求1所述的一種基于夾板水培法的玉米根系突變體篩選方法，其特征在于，在S4中，所述無紡布培養袋具體為12×15 cm的無紡布培養袋，培養基質為營養土和蛭石，且其比例為3：1。