[發明專利]一種利用轉長鏈非編碼RNA基因砧木增強果桑耐鹽能力的方法有效
| 申請號： | 202010748622.8 | 申請日： | 2020-07-30 |
| 公開（公告）號： | CN111849989B | 公開（公告）日： | 2021-11-23 |
| 發明（設計）人： | 冀憲領;蓋英萍;劉壯 | 申請（專利權）人： | 山東農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/113 | 分類號： | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/06;A01H6/00 |
| 代理公司： | 濟南譽豐專利代理事務所(普通合伙企業) 37240 | 代理人： | 薛鵬喜 |
| 地址： | 271018 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 轉長鏈非 編碼 rna 基因 砧木 增強 果桑耐鹽 能力 方法 | ||
1.一種與桑樹耐鹽性相關的lncRNA，其選自如下（1）或（2）所示的核酸分子中的至少一種：
（1）序列如SEQ ID NO.1所示的核酸分子；
（2）序列如SEQ ID NO.2所示的核酸分子。
2.含有權利要求1所述lncRNA的植物表達載體。
3.含有權利要求2所述植物表達載體的重組菌。
4.權利要求1所述的lncRNA、權利要求2所述的植物表達載體或權利要求3所述的重組菌在提高植物耐鹽性中的應用；所述植物為桑樹。
5.一種利用轉長鏈非編碼RNA基因砧木增強果桑耐鹽能力的方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）將權利要求1所述的lncRNA基因序列置于CaMV35S強啟動子之下，構建植物表達載體；
（2）將步驟（1）構建的植物表達載體轉入發根農桿菌K599感受態細胞，獲得轉化子；
（3）利用步驟（2）的轉化子轉化桑樹，得到轉基因桑樹毛狀根；
（4）以轉基因桑樹毛狀根為砧木，通過嫁接獲得具有較強耐鹽能力的果桑嫁接苗。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述轉基因桑樹毛狀根的具體獲得方法為：
將轉化子懸浮液注射至桑樹實生苗真葉與子葉之間的上胚軸內，注射后用濕的細沙土培埋接種幼苗的上胚軸，將幼苗培養至注射部位長出毛狀根。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述培養包括：弱光下培養3d后轉為正常光照培養20d，逐步撤除拱棚，繼續培養30d；將苗木起出，篩選出注射部位生出毛狀根的幼苗。
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