[發明專利]布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗及制備方法和應用

有效

• 申請號: 202010747446.6
• 申請日: 2020-07-29
• 公開（公告）號: CN111773384B
• 公開（公告）日: 2023-09-08
• 發明（設計）人: 賀筍;何傳雨;劉夢志;趙海龍;任立松;吳冬玲;李明啟;李延濤
• 申請（專利權）人: 天康生物制藥有限公司
• 主分類號: A61K39/295
• 分類號: A61K39/295;A61K39/135;A61K39/10;A61P31/14;A61P31/04;C12N1/21;C12N15/55;C12N15/34;C12R1/01
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本發明提供了一種布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗及制備方法和應用，涉及生物技術領域，本發明提供的布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗，利用布魯氏菌菌影抗原作為載體，將口蹄疫病毒樣顆粒裝載其中，進而做到一種疫苗預防兩種疾病的目的，同時杜絕布魯氏菌活疫苗使用過程中的生物安全風險，克服口蹄疫疫苗使用過程中副反應問題。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，尤其是涉及一種布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗及制備方法和應用。

背景技術

隨著奶牛養殖行業集約化和養殖密度的提升，布魯氏菌病、口蹄疫成為了危害奶牛業發展的重大疾病，同時布魯氏菌病作為人蓄共患病危害日益增大，患病動物為主要傳染源，人無疫苗可用，但當下所使用的活疫苗對人和動物均有感染風險；口蹄疫疫苗在使用過程中因其含有大量的佐劑成份，奶牛免疫后存在一定的副反應，比如體溫升高、食欲廢退、產奶量下降等。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一個目的在于提供一種布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗，以至少緩解了現有技術中存在的技術問題之一。

本發明的第二個目的在于提供上述布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗的制備方法。

本發明的第三個目的在于提供上述布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗在制備預防布魯氏菌病和/或口蹄疫的產品中的應用。

本發明提供了一種布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗，所述布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗包括口蹄疫病毒樣顆粒和裝載所述口蹄疫病毒樣顆粒的布魯氏菌菌影。

進一步的，所述布魯氏菌菌影與口蹄疫病毒樣顆粒的用量比為2:1～3:1(w/w)，優選為2.5:1。

進一步的，每頭份所述布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗中含布魯氏菌菌影25～35μg，優選為28μg。

進一步的，所述布魯氏菌菌影由含有噬菌體裂解蛋白E基因和金黃色葡萄球菌核酸酶A基因的布魯氏菌疫苗菌株制備得到。

進一步的，所述噬菌體裂解蛋白E基因具有如SEQ?ID?NO.1所示的核苷酸序列；

優選地，所述金黃色葡萄球菌核酸酶A基因具有如SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列；

優選地，所述布魯氏菌菌株為A19菌株。

進一步的，所述噬菌體裂解蛋白E基因表達噬菌體裂解蛋白E，所述金黃色葡萄球菌核酸酶A基因表達金黃色葡萄球菌核酸酶A；

所述噬菌體裂解蛋白E與所述金黃色葡萄球菌核酸酶A通過linker氨基酸相連接。

進一步的，由氨基端至羧基端依次為噬菌體裂解蛋白E、linker氨基酸和金黃色葡萄球菌核酸酶A；

優選地，所述linker氨基酸具有如SEQ?ID?NO.3所示的氨基酸序列。

進一步的，所述口蹄疫病毒樣顆粒由酵母菌表達組裝制成。

本發明還提供了上述的布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗的制備方法，將口蹄疫病毒樣顆粒裝載入布魯氏菌菌影中，得到所述布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗。

進一步的，所述裝載至少滿足如下條件之一：

溫度為2～8℃；轉速為100～120轉/min；時間為25～30min；

優選地，溫度為4～6℃；轉速為115轉/min；時間為26min。

此外，本發明還提供了上述布魯氏菌病和口蹄疫二聯疫苗在制備預防布魯氏菌病和/或口蹄疫的產品中的應用。

與現有技術相比，本發明具有如下有益效果：