[發明專利]一種兼具抗菌、抗炎、解毒活性的多功能雜合肽及其應用

有效

• 申請號: 202010743440.1
• 申請日: 2020-07-29
• 公開（公告）號: CN111944060B
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 張日俊;張璐璐;衛旭彪;黃燕;斯大勇;王曉冰;郭賀楠
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K38/16;A61P31/00;A61P31/04;A61P29/00;A23L33/18;A23K20/147
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 陳征

本發明涉及蛋白質工程技術領域，具體涉及一種兼具抗菌、抗炎、解毒活性的多功能雜合肽及其應用。本發明提供的多功能雜合肽命名為CLA，其為免疫抗炎雜合肽LTA和抗菌抗病毒雜合肽CL經蛋白質工程計算機設計、雜合、體內外復篩得到，氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。多功能雜合肽具有較高的抗菌、消解內毒素、免疫調節、抗炎及抗感染功能，且具有細胞毒性低、安全性高等優勢，可作為理想的抗生素替代品和人畜生物性抗菌藥物、抗感染藥物、飼料添加劑、防腐劑、消殺劑、免疫調節劑或抗炎劑，具有很好的應用潛力和價值。

技術領域

本發明涉及蛋白質工程技術領域，具體涉及一種兼具抗菌、抗炎、解讀活性的新型多功能雜合肽及其應用。

背景技術

細菌感染是致病菌或條件致病菌侵入動物機體中生長繁殖，產生毒素(如內毒素)和其他代謝產物所引起的感染性疾病，可誘發炎癥以及氧化損傷等，重則損壞免疫系統，甚至導致死亡。動物在幼齡、體弱、疾病、應激、病原感染等情況下，經常導致免疫力降低，進而發生繼發感染(細菌感染等)，引起炎性反應。對于感染和炎癥治療，傳統的防治策略是使用抗生素和化學藥物制劑。抗生素和化學藥物制劑的持續使用不僅容易產生耐藥性和多種副作用，而且容易造成藥物殘留和食品安全風險。

近年來，科學家們努力探索新型抗病原微生物及抗炎藥物，主要包括功能性益生菌制劑、植物提取物以及生物活性肽等。

生物活性肽是指對機體生命活動有益或者具有一定生理作用的肽類化合物，其分子量一般小于6000Da。由于它們的氨基酸組成，排列順序以及空間結構的不同,從而表現出不同的生理功能，如免疫調節、抗炎、鎮靜、抗菌、抗病毒、抗氧化、降血壓等作用。隨著進一步的研究發現很多生物活性肽還具有不易產生耐藥性和藥物殘留等優勢。所以，生物活性肽在提高畜禽免疫力，防治病原體引起的感染、炎癥、免疫損傷等方面具有廣闊的應用前景和開發潛力

然而，天然的生物活性肽也存在著一些缺陷，主要表現為：(1)有些天然生物活性肽的生物活性相對較低、功能較單一，如豬的乳鐵蛋白肽存在抗菌活性較弱的問題；而天蠶素A雖然具有良好的抗菌功效，但其抗炎能力卻相對較弱，因此這使天然生物活性肽難以全面取代抗生素；(2)一些天然生物活性肽的細胞毒性較高，在抑殺病原微生物的同時也會造成機體的嚴重損傷(如蜂毒素(melittin)和LL-37)；(3)多數天然活性肽體內穩定性較差，半衰期較短，易被降解(胃腸損失)，這格外增加了其實際應用難度。

隨著對生物活性肽的結構、功能與作用機理研究的不斷深入，科研人員開始嘗試利用蛋白質工程方法設計安全性更高、調節活性更強、功能更全面的多功能生物活性肽。已有研究報道通過將不同類型的多肽進行雜合是獲得兼具新型多功能雜合肽。

發明內容

為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供一種兼具抗菌、抗炎、解毒活性的新型多功能雜合肽及其應用。

為實現上述目的，本發明的技術方案如下：本發明在對免疫抗炎多肽LTA(公開于中國專利CN110066342A)及抗菌抗病毒多肽CL(公開于中國專利CN110305222A)的序列、結構以及序列結構與功能的關系進行大量研究的基礎上，運用蛋白質分子設計技術進行多肽LTA(氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示)和多肽CL(氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示)的雜合優化，獲得一種新型多功能雜合肽，命名為CLA，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。雜合肽CLA同時具有兩個母源肽的功能，即具有抗菌、消解內毒素、抗感染、抗炎等多重功能。

具體地，本發明提供以下技術方案：

本發明提供一種雜合肽，其包含：肽I以及與肽I融合的肽II，其中，肽I的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，肽II的氨基酸序列如SEQ ID NO.2的第19～32位所示。

本發明所述的雜合肽的結構優選為：肽II的N端與肽I的C端直接或經連接肽融合。