[發明專利]一種優化的生姜脫毒苗再生擴繁方法及其產業化流程的開發

在審

• 申請號: 202010741973.6
• 申請日: 2020-07-31
• 公開（公告）號: CN111771725A
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 公小君;劉鳳麗;林愛華;王喜萍
• 申請（專利權）人: 濰坊興旺生物種業有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種優化的生姜脫毒苗的再生擴繁方法及其產業化流程的開發，其特征在于：確定了最佳的外植體類型、消毒方法、細胞分類素、誘導培養基配方、煉苗條件以及培養條件。優化后的生姜脫毒苗從外植體到TC0生根苗需要3.5?4.5個月，之后每繼代一次需要1.5個月左右，全過程染菌率低于5%，TC0出芽率最高可達800%，后面每次繼代分化效率最高可達300%，生根率可達100%，組培苗移栽成活率達到80%以上，生根苗田間擴繁2?3代即可作為姜種應用于產業化，本方法脫毒苗擴繁效率高、狀態好、周期短。

技術領域

本發明屬于植物組織培養技術領域，具體涉及一種生姜脫毒苗的擴繁及其產業化流程的方法。

背景技術

生姜是姜科植物的根莖，屬多年生草本植物，宜生長在溫和、遮陰、潮濕的環境中，因品種不同而具有白色、米色、茶色、黃色和金黃色等多種顏色，性溫、味辛，具有很高的營養價值和藥用價值。生姜作為食材和藥材，由來已久，中醫認為，生姜為藥中佳品，具有解表散寒、消炎抗菌的功效，可用于治療傷風感冒、胃寒嘔吐等癥狀；同時，生姜在抗氧化、抗衰老和抗腫瘤有一定的作用，能在一定程度上抑制癌細胞的生長；此外，生姜具有驅寒活血、降血脂的作用，民間常用生姜泡酒，利用其祛風寒、通經絡的作用來緩解關節炎等疾病的痛楚。

中國是世界上生姜栽培面積最大且生產總量最多的國家，作為常見的調味植物，生姜在我國的種植面積十分廣泛，其中，南方主要以廣東、浙江、湖南、安徽、和四川等地種植為主，北方則主要以山東省種植面積最大，2018年中國生姜種植面積達30萬公頃。中國又是全球生姜第一出口大國，生姜出口主要以未磨姜為主，其中美國、日本、巴基斯坦、荷蘭等國是我國生姜主要出口國，2018 年中國生姜(未磨的姜)出口數量達48萬噸。由此可見生姜在我國是一種重要的經濟作物。

由于生姜不開花或少開花，無法進行有性繁殖，只能通過地下莖塊進行無性繁殖。經過多世代的無性繁殖，病毒容易積累，造成生姜的種性退化、抗逆性下降等不良影響，從而導致減產、品質下降等不可挽回的經濟損失。常見的病害包括姜瘟病、姜腐霉根腐病、姜枯萎病、姜斑點病、姜炭疽病、姜細菌性葉枯病、姜細菌性軟腐病等。為了防止這些病害，大量的農藥噴施灌根，不僅帶來了成本的增加，還會帶來農藥殘留、環境污染等問題。因此如何讓生姜脫毒，將為生姜產業的綜合發展帶來重要的意義。

生姜的組織培養利用植物的全能性，經過脫分化、再分化、不定芽伸長、生根等階段，獲得無菌組培苗。生姜組培苗不但可以實現脫毒、恢復生姜的種性，還具有不受季節、場地的限制等優良特點。但目前現有的生姜組織培養技術還具有易生菌、繁殖效率低、多次繼代后長勢差等不足，無法大面積的進行應用。

發明內容

本發明針對現有生姜組織培養技術的不足，從外植體的選擇、外植體消毒條件、培養基激素條件、煉苗方式等幾個方面進行優化，確立了一種無菌、擴繁系數高、長勢正?？梢远啻卫^代、成活率高的生姜脫毒苗再生擴繁方法，并開發了一套生姜脫毒苗產業化流程。

為實現上述目的，本發明采用下述技術方案：

(1)選材：選取肥大、飽滿、皮色光亮、肉質新鮮、不干不縮、不腐爛、未受凍、質地硬的姜塊；

(2)催芽：將選取好的生姜塊莖置于無光照室內，維持溫度25-30℃，濕度40-50％，催芽25-35天，待姜芽生長至1-2cm時切下；

(3)脫毒再生及繼代：將步驟(2)中得到的姜芽外植體用自來水清洗，去除最外緣表皮，于超凈工作臺內用75％酒精處理1min，0.1％升汞處理10min， 2.5％次氯酸鈉處理10min，無菌水清洗3-5次，剝離葉原基后置于誘導培養基上，脫分化、分化、生根、成苗，培養條件為25-28℃，每天光照16h，光照強度為2500-3000Lux，培養100-130天可煉苗，培養至60-90天時可對分化芽進行重復繼代，繼代培養周期為40-50天。