[發(fā)明專利]用于疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)裝置及培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010741163.0
• 申請日: 2020-07-29
• 公開（公告）號: CN111733076B
• 公開（公告）日: 2020-11-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 高輝;阮承邁;李鳳凱
• 申請（專利權(quán)）人: 天津中逸安健生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/07
• 分類號: C12N5/07;C12M3/00;C12M1/10;C12M1/36;C12M1/00
• 代理公司: 北京慕達星云知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 孫光遠

1.用于疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)裝置，其特征在于，包括：圓盤；

所述圓盤包括環(huán)形蓋板、底壁和沿底壁外緣延伸的側(cè)壁；

所述底壁內(nèi)側(cè)由外緣至中心依次設(shè)置有培養(yǎng)液收集槽、導(dǎo)流坡和培養(yǎng)平面；

其中，所述側(cè)壁、底壁與導(dǎo)流坡圍成培養(yǎng)液收集槽；所述培養(yǎng)液收集槽的底部開設(shè)有液體收集孔；

所述導(dǎo)流坡的底端連接培養(yǎng)平面；

所述環(huán)形蓋板與側(cè)壁密封連接，且內(nèi)徑與培養(yǎng)平面的外徑相同；

還包括：固定孔、轉(zhuǎn)動軸、電機和控制器；

所述固定孔與導(dǎo)流坡高度相同；

所述電機與控制器電連接，所述電機的輸出端與轉(zhuǎn)動軸連接；

所述底壁外側(cè)設(shè)置有動力凸點，所述轉(zhuǎn)動軸底端連接有底座，所述底座上靠近轉(zhuǎn)動軸處設(shè)置有與動力凸點相匹配的凹點；

所述圓盤通過固定孔固定在轉(zhuǎn)動軸上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述液體收集孔的出口端安裝有閥門。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述閥門與控制器電連接。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)裝置，其特征在于，所述圓盤由聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯、聚苯乙烯、苯乙烯丙烯腈、苯乙烯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、聚氯乙烯中的一種或幾種的混合物制成。

5.一種使用權(quán)利要求1-4任一項所述用于疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)裝置進行培養(yǎng)的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將復(fù)蘇的細胞種子和培養(yǎng)基混合后從環(huán)形蓋板的開口端加至培養(yǎng)平面上，進行細胞貼壁培養(yǎng)；

(2)細胞貼壁培養(yǎng)24-72h后，離心，收集原培養(yǎng)基，然后向培養(yǎng)平面上加入新培養(yǎng)基，完成換液過程；

(3)使用顯微攝像裝置在培養(yǎng)平面的底部進行觀察；

(4)離心，收集新培養(yǎng)基，然后向培養(yǎng)平面上加入清洗液，離心，收集清洗液，然后向培養(yǎng)平面上加入含有蛋白酶的細胞分離液，進行溫育；

(5)降低轉(zhuǎn)速，將沖洗液噴至培養(yǎng)平面，將細胞從培養(yǎng)平面上分離下來，提高轉(zhuǎn)速，離心，收集含細胞的液體。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(1)還包括：將該培養(yǎng)裝置放置在溫度為27-37℃，濕度為80-100％，CO₂濃度為0-8％的無菌環(huán)境中。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(2)和步驟(4)中離心速度均為10-200rpm。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(4)溫育溫度為27-37℃，溫育時間為1-10min。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述一種疫苗生產(chǎn)自動化動物細胞擴增的培養(yǎng)方法，其特征在于，所述步驟(5)降低轉(zhuǎn)速至1-50rpm，提高轉(zhuǎn)速至10-200rpm。